Ključna razlika između apsorbancije i fluorescencije je u tome što možemo koristiti tehniku analize apsorbancije za izravno mjerenje količine specifične valne duljine koju apsorbira uzorak bez razrjeđivanja ili pripreme testa, dok analiza fluorescencije zahtijeva pripremu uzorka u kojoj uzorak od interesa mora biti vezan s fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu.
Apsorbancija i fluorescencija važne su analitičke tehnike koje možemo koristiti za otkrivanje različitih svojstava u danom uzorku.
Što je apsorpcija?
Apsorbancija je mjera sposobnosti tvari da apsorbira svjetlost određene valne duljine. Točnije, jednak je logaritmu recipročne vrijednosti prijenosa. Za razliku od optičke gustoće, apsorbancija mjeri količinu svjetlosti koju tvar apsorbira.
Nadalje, spektroskopija mjeri apsorbanciju (koristeći kolorimetar ili spektrofotometar). Apsorpcija je svojstvo bez dimenzije, za razliku od većine drugih fizikalnih svojstava. Postoje dva načina da se objasni apsorbancija: kao svjetlost koju apsorbira uzorak ili kao svjetlost propuštena kroz uzorak. Jednadžba za izračun apsorbancije je sljedeća:
A=log10(I0/I)
Gdje je A apsorbancija, I0 je zračenje koje prenosi uzorak, a I je upadno zračenje. Sljedeća jednadžba je također slična gornjoj jednadžbi u smislu propusnosti (T).
A=-log10T
Što je fluorescencija?
Fluorescencija je emisija svjetlosti iz tvari koja je prethodno apsorbirala energiju. Takve tvari moraju apsorbirati svjetlost ili bilo koje drugo elektromagnetsko zračenje da bi emitirale svjetlost kao fluorescenciju. Nadalje, ovo emitirano svjetlo je vrsta luminescencije, što znači da emitira spontano. Emitirana svjetlost često ima dužu valnu duljinu od apsorbirane svjetlosti. To znači da je emitirana svjetlosna energija niža od apsorbirane energije.
Tijekom procesa fluorescencije, svjetlost se emitira kao rezultat ekscitacije atoma u tvari. Apsorbirana energija često se oslobađa kao luminiscencija u vrlo kratkom vremenskom razdoblju, oko 10-8 sekundi. To znači da možemo promatrati fluorescenciju čim uklonimo izvor zračenja koji uzrokuje ekscitaciju.
Postoje mnoge primjene fluorescencije u različitim područjima, kao što su mineralogija, gemologija, medicina, kemijski senzori, biokemijska istraživanja, boje, biološki detektori, proizvodnja fluorescentnih lampi itd. Štoviše, ovaj proces možemo pronaći i kao prirodni proces; primjerice u nekim mineralima.
Koja je razlika između apsorpcije i fluorescencije?
Apsorbancija i fluorescencija važne su analitičke tehnike koje možemo koristiti za otkrivanje različitih svojstava u danom uzorku. Ključna razlika između apsorbancije i fluorescencije je u tome što možemo upotrijebiti tehniku analize apsorbancije za izravno mjerenje količine specifične valne duljine koju apsorbira uzorak bez razrjeđivanja ili pripreme testa, dok analiza fluorescencije zahtijeva pripremu uzorka u kojoj uzorak od interesa mora biti vezan s fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu. Štoviše, tehnika fluorescencije učinkovitija je od apsorbancije jer je analiza fluorescencije vrlo specifična za ciljni analit.
Infografika u nastavku predstavlja razlike između apsorbancije i fluorescencije u tabličnom obliku za usporedbu jedna uz drugu
Sažetak – apsorpcija u odnosu na fluorescenciju
Apsorbancija je mjera sposobnosti tvari da apsorbira svjetlost određene valne duljine. Fluorescencija je emisija svjetlosti iz tvari koja je prethodno apsorbirala energiju. Ključna razlika između apsorbancije i fluorescencije je u tome što možemo upotrijebiti tehniku analize apsorbancije za izravno mjerenje količine specifične valne duljine koju apsorbira uzorak bez razrjeđivanja ili pripreme testa, dok analiza fluorescencije zahtijeva pripremu uzorka u kojoj uzorak od interesa mora biti vezan s fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu.
