Ključna razlika – Genska terapija Ex Vivo naspram In Vivo
Genska terapija je važna tehnika koja se koristi za liječenje ili prevenciju genetskih bolesti uvođenjem gena za nedostajuće ili defektne gene. Određene bolesti mogu se izliječiti umetanjem zdravih gena umjesto mutiranih gena ili gena koji nedostaju odgovornih za bolest. Genska terapija se uglavnom primjenjuje na somatske stanice nego na stanice zametne linije, a može se kategorizirati u dvije glavne vrste nazvane Ex vivo genska terapija i In vivo genska terapija. Ključna razlika između Ex vivo i In vivo genske terapije je u tome što se terapeutski geni prenose u in vitro stanične kulture i ponovno uvode u pacijenta u ex vivo genskoj terapiji, dok se geni isporučuju izravno u pacijentova tkiva ili stanice bez uzgoja stanica in vitro u in vivo genska terapija.
Što je ex vivo genska terapija?
Ex vivo genska terapija je vrsta genske terapije koja uključuje vanjsku modifikaciju pacijentove stanice i njezino ponovno uvođenje u pacijenta. Stanice se uzgajaju u laboratorijima (izvan tijela pacijenta), a geni se umeću. Zatim se stabilni transformanti odabiru i ponovno uvode u pacijenta za liječenje bolesti. Genska terapija ex vivo može se primijeniti samo na određene vrste stanica ili odabrana tkiva. Stanice koštane srži su stanice koje se često koriste za ex vivo gensku terapiju.
Postupak ex vivo genske terapije
Postoji nekoliko glavnih koraka uključenih u Ex vivo gensku terapiju kako slijedi;
- Stanice s defektnim genima izoliraju se iz pacijenta.
- Izolirane stanice uzgajaju se u kulturama u laboratoriju.
- Terapeutski geni se ubacuju ili uvode u uzgojene stanične kulture pomoću vektora.
- Transformirane stanice odabiru se iz netransformiranih i uzgajaju.
- Odabrane stanice se transplantiraju u pacijenta.
U ex vivo genskoj terapiji, nosači ili vektori koriste se za dostavu gena u ciljne stanice. Uspješna isporuka gena ovisi o sustavu nosača, a važni vektori koji se koriste u genskoj terapiji ex vivo su virusi, stanice koštane srži, ljudski umjetni kromosom itd. U usporedbi s genskom terapijom in vivo, genska terapija ex vivo ne uključuje negativne imunološke reakcije u tijelu pacijenta budući da se genetska korekcija radi in vitro. Međutim, uspjeh ovisi o stabilnoj ugradnji i ekspresiji ljekovitog gena unutar tijela pacijenta.
Slika 01: Ex vivo genska terapija
Što je in vivo genska terapija?
Genska terapija in vivo je tehnika koja uključuje izravnu dostavu gena u stanice određenog tkiva unutar tijela pacijenta za liječenje genetskih bolesti. Može se primijeniti na mnoga tkiva ljudskog tijela uključujući jetru, mišiće, kožu, pluća, slezenu, mozak, krvne stanice, itd. Terapeutski geni se unose virusnim ili nevirusnim vektorima u pacijenta. Međutim, uspjeh ovisi o nekoliko čimbenika kao što su učinkovito preuzimanje vektora koji nose terapeutski gen od strane ciljnih stanica, unutarstanična degradacija gena unutar ciljnih stanica i preuzimanje gena od strane jezgre, sposobnost ekspresije gena itd.
Slika 02: Genska terapija in vivo
Koja je razlika između ex vivo i in vivo genske terapije?
Ex Vivo vs In Vivo genska terapija |
|
| Ex vivo genska terapija je vrsta genske terapije koja se provodi izvan tijela pacijenta. Modifikacija gena vrši se izvan tijela. | Genska terapija in vivo još je jedna vrsta genske terapije koja se provodi izravno kada su defektne stanice još u tijelu. Geni se mijenjaju dok su još u tijelu. |
| Izolacija i kultiviranje | |
| Defektne stanice se izoliraju i uzgajaju u laboratoriju. | Neispravne stanice se ne izoliraju niti uzgajaju u laboratoriju. |
| Izbor Transformanata | |
| Stabilni transformanti se odabiru prije reintrodukcije. | Stabilni transformanti se ne mogu odabrati. |
| Štetni imunološki odgovor | |
| Ova metoda ne uvodi štetne imunološke reakcije u tijelo pacijenta. | Ova metoda uvodi nepovoljne imunološke reakcije u tijelo pacijenta. |
Sažetak – Genska terapija Ex Vivo nasuprot In Vivo
Terapeutski geni se unose u tijelo pacijenta kao lijek za određene bolesti. Poznata je kao genska terapija i može se provoditi na dva načina, naime ex vivo genska terapija i in vivo genska terapija. Razlika između ex vivo i in vivo genske terapije je u tome što se umetanje gena u ex vivo genskoj terapiji vrši u kulturama stanica izvan tijela pacijenta i ispravljene stanice se ponovno uvode u pacijenta, dok se u in vivo genskoj terapiji geni uvode izravno u unutarnja ciljana tkiva bez izolacije stanica. Uspjeh oba procesa ovisi o stabilnom umetanju i transformaciji terapeutskih gena u stanice pacijenta.
