Ključna razlika između HEK293 i HEK293t je ta što je HEK293 besmrtna stanična linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transfektiran odsječenim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA, dok je HEK293t stanična linija kćeri izvedena iz izvorne stanične linije HEK293 koja je transfektiran plazmidnim vektorom koji nosi SV40 ishodište replikacije.
Transfekcija se obično definira kao proces unošenja strane DNA i RNA u stanice kako bi se utjecalo na njihov genotip i fenotip. Takvo unošenje stranih nukleinskih kiselina različitim biološkim, kemijskim i fizikalnim metodama može promijeniti svojstva stanice. U konačnici, ovo omogućuje proučavanje funkcije gena i ekspresije proteina u kontekstu stanice. HEK293 i HEK293t dvije su stanične linije koje se godinama intenzivno koriste u istraživanju stanične biologije zbog svoje sklonosti transfekciji.
Što je HEK293?
HEK293 je besmrtna stanična linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transfektiran odsječenim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA za proizvodnju mnogih rekombinantnih proteina. HEK293 izvorno je iz stanica ljudskih bubrega izolirao nizozemski biolog Alex Van der Eb 1973. godine. Te su stanice uzgojene u kulturi tkiva ženskog fetusa. Kasnije ih je Frank Graham, postdoktorand u Van der Ebovom laboratoriju, transficirao odsječenim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA. Ova stanična linija nazvana je HEK293 jer je to bio Frankov 293rd eksperiment.
Slika 01: HEK293
Ugradnja adenovirusnih gena u genom HEK stanica omogućuje ovim stanicama vrlo učinkovitu proizvodnju velike količine rekombinantnih proteina. Štoviše, adenovirusni vektor sadrži CMV promotorsku regiju; dakle, dodatno povećava ovu učinkovitost. Ova stanična linija korištena je kao domaćin za studije ekspresije gena. Ovu staničnu liniju također koristi biotehnološka industrija za proizvodnju terapeutskih proteina za gensku terapiju.
Što je HEK293t?
HEK293t je stanična linija kćeri izvedena iz originalne stanične linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 ishodište replikacije kako bi se proizvela velika količina rekombinantnih proteina. HEK293t je ljudska stanična linija koja eksprimira mutiranu verziju velikog T antigena SV40. HEK293t stvoren je u laboratoriju Michele Carlos na Stanfordu kroz stabilnu transfekciju stanične linije HEK29E s plazmidom koji kodira temperaturno osjetljiv mutant SV40 velikog T antigena. Izvorno se spominjao kao 293/tsA1609neo. To je zato što se transfekcija koristi za stvaranje stanične linije koja daje otpornost na neomicin i ekspresiju alela tsA 1609 velikog T antigena SV40.
Slika 02: HEK293t
Zbog ekspresije mutirane verzije SV40 velikog T antigena, transfektirani plazmidi sa SV 40 ishodištem replikacije mogu uvelike povećati količinu rekombinantnog proteina. Ova se stanična linija obično koristi u biotehnološkoj industriji za ekspresiju proteina i proizvodnju rekombinantnih retrovirusa.
Koje su sličnosti između HEK293 i HEK293t?
- HEK293 i HEK293t dvije su stanične linije koje su se intenzivno koristile u istraživanju stanične biologije zbog svoje sklonosti transfekciji.
- Obje stanične linije su laboratorijski izvedene.
- Ove stanične linije mogu uvelike povećati količinu proizvodnje rekombinantnih proteina.
- Nastaju transfekcijom embrionalnih stanica ljudskih bubrega plazmidnim vektorom.
Koja je razlika između HEK293 i HEK293t?
HEK293 je besmrtna stanična linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transfektiran odsječenim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA. Nasuprot tome, HEK293t je stanična linija kćeri izvedena iz originalne stanične linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 ishodište replikacije. Dakle, ovo je ključna razlika između HEK293 i HEK293t. Nadalje, HEK293 ne izražava mutiranu verziju SV40 velikog T antigena. S druge strane, HEK293t izražava mutiranu verziju SV40 velikog T antigena.
Sljedeća infografika navodi razlike između HEK293 i HEK293t u obliku tablice za usporedbu.
Sažetak – HEK293 vs HEK293t
HEK293 i HEK293t su dvije stanične linije koje su se intenzivno koristile u istraživanju stanične biologije zbog njihovog postojanog rasta i sklonosti transfekciji. HEK293 je besmrtna stanična linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transfektiran odsječenim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA, dok je HEK293t stanična linija kćeri izvedena iz izvorne stanične linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 ishodište replikacije. Dakle, ovo sažima razliku između HEK293 i HEK293t.
