Ključna razlika – UV naspram vidljivog spektrofotometra
Nema razlike između UV i vidljivog spektrofotometra jer se oba ova naziva koriste za isti analitički instrument.
Ovaj instrument je poznat kao UV-vidljivi spektrofotometar ili ultraljubičasto-vidljivi spektrofotometar. Ovaj instrument koristi tehniku apsorpcijske spektroskopije u ultraljubičastom i vidljivom spektralnom području.
Što je UV spektrofotometar (ili vidljivi spektrofotometar)?
UV spektrofotometar, poznat i kao vidljivi spektrofotometar, analitički je instrument koji analizira tekuće uzorke mjerenjem njihove sposobnosti apsorpcije zračenja u ultraljubičastom i vidljivom spektralnom području. To znači da ova tehnika apsorpcijske spektroskopije koristi svjetlosne valove u vidljivim i susjednim područjima u elektromagnetskom spektru. Apsorpcijska spektroskopija bavi se pobuđivanjem elektrona (kretanje elektrona iz osnovnog stanja u pobuđeno stanje) kada atomi u uzorku apsorbiraju svjetlosnu energiju.
Slika 01: UV-vidljivi spektrofotometar
Elektronska pobuđenja odvijaju se u molekulama koje sadrže pi elektrone ili nevezne elektrone. Ako se elektroni molekula u uzorku mogu lako pobuditi, uzorak može apsorbirati veće valne duljine. Kao rezultat toga, elektroni u pi vezama ili nevezujućim orbitalama mogu apsorbirati energiju svjetlosnih valova u UV ili vidljivom području.
Glavne prednosti UV-Visible spektrofotometra uključuju jednostavan rad, visoku ponovljivost, isplativu analizu itd. Osim toga, može koristiti širok raspon valnih duljina za mjerenje analita.
Beer-Lambertov zakon
Beer-Lambertov zakon daje apsorpciju određene valne duljine od strane uzorka. Kaže da je apsorpcija valnih duljina uzorka izravno proporcionalna koncentraciji analita u uzorku i duljini puta (udaljenost koju svjetlosni val prijeđe kroz uzorak).
A=εbC
Gdje je A apsorbancija, ε koeficijent apsorpcije, b duljina puta, a C koncentracija analita. Međutim, postoje neka praktična razmatranja u vezi s analizom. Koeficijent apsorpcije ovisi samo o kemijskom sastavu analita. Spektrofotometar treba imati monokromatski izvor svjetlosti.
Osnovni dijelovi UV-vidljivog spektrofotometra
- Izvor svjetla
- Držač uzorka
- Ogibne rešetke u monokromatoru (za odvajanje različitih valnih duljina)
- Detektor
UV-vidljivi spektrofotometar može koristiti jednu svjetlosnu zraku ili dvostruku zraku. Kod spektrofotometara s jednim snopom sva svjetlost prolazi kroz uzorak. Ali u spektrofotometru s dvostrukom zrakom, svjetlosna zraka se dijeli na dvije frakcije, a jedna zraka prolazi kroz uzorak, dok druga zraka postaje referentna zraka. Ovo je naprednije od korištenja jedne svjetlosne zrake.
Upotrebe UV-vidljivog spektrofotometra
UV-vidljivi spektrofotometar može se koristiti za kvantificiranje otopljenih tvari u otopini. Ovaj se instrument može koristiti za kvantificiranje analita kao što su prijelazni metali i konjugirani organski spojevi (molekule koje sadrže izmjenične pi veze). Možemo koristiti ovaj instrument za proučavanje rješenja, ali ponekad znanstvenici koriste ovu tehniku i za analizu krutih tvari i plinova.
Sažetak – UV vs vidljivi spektrofotometar
UV-vidljivi spektrofotometar je instrument koji koristi tehnike apsorpcijske spektroskopije za kvantificiranje analita u uzorku. Nema razlike između UV i vidljivog spektrofotometra jer se oba naziva odnose na isti analitički instrument.