Ključna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina je u tome što se Bradfordov test proteina temelji na pomaku apsorbancije boje Coomassie brilliant blue G-250 dok se Lowryjev test proteina temelji na reakciji iona bakra (Cu+) iona nastaje oksidacijom peptidnih veza s Folin–Cioc alteu reagensom.
Analiza je analitička tehnika koja pomaže karakterizirati glavne funkcionalne komponente uzorka. Stoga bi test mogao biti kvalitativni ili kvantitativni test. Mnoga područja, uključujući laboratorijsku medicinu, farmakologiju, biologiju okoliša, molekularnu biologiju, biokemiju i imunologiju, rutinski koriste ovu vrstu testova. Bradford i Lowry proteinski test dva su biokemijska testa koji određuju koncentraciju proteina u otopini uzorka. Oba testa koriste kolorimetrijske tehnike za pružanje rezultata.
Što je Bradfordov test proteina?
Bradfordov test proteina je brzi spektroskopski analitički postupak za analizu proteina. Pokazuje visoku točnost pri mjerenju koncentracije proteina u otopini. Marion Bradford uvela je ovaj postupak 1976. U ovom testu, ukupna reakcija temelji se na sastavu aminokiselina mjerenih proteina. Drugim riječima, Bradfordov test proteina je kolorimetrijski test. Koristi boju Coomassie brilliant blue. Dakle, ovaj kolorimetrijski test proteina ovisi o pomaku apsorbancije boje. Coomassie brilliant blue G-250 postoji u tri formata: kationski (crveni), anionski (plavi) i neutralni (zeleni). Tijekom kiselih uvjeta, crveni oblik boje se pretvara u plavi. Potvrđuje vezanje proteina. Ako protein nije prisutan, otopina može ostati smeđe boje.
Slika 01: Bradfordov test proteina
Bradfordov test proteina razlikuje se od ostalih testova proteina jer je manje osjetljiv na interferenciju različitih kemijskih spojeva prisutnih u otopini proteina. Ovi spojevi uključuju natrij, kalij, glukozu i saharozu, itd.
Što je Lowry proteinski test?
Lowry proteinski test je biokemijski test koji se koristi za određivanje ukupne razine proteina u otopini. Oliver H. Lowry je osoba koja je razvila ovaj reagens 1940. godine. Postupak prikazuje ukupnu koncentraciju proteina u otopini promjenom boje koja je proporcionalna koncentraciji proteina u otopini. Stoga je ovo također kolorimetrijski test proteina.
Reakcija između iona bakra (Cu+) nastalih oksidacijom peptidnih veza i Folin–Cioc alteu reagensa osnova je ovog postupka. Također, ovaj reagens sadrži fosfomolibdinsku kiselinu i fosfor-volframovu kiselinu. Međutim, reakcijski mehanizam Lowry proteinske analize nije dobro shvaćen. Ali to uključuje oksidaciju ostataka cisteina, triptofana i tirozina redukcijom Folin–Cioc alteu reagensa.
Slika 02: Lowry analiza proteina
Ostaci cisteina doprinose apsorbanciji opaženoj u Lowry testu proteina, a reakcija rezultira sjajnom plavom molekulom; heteropoli molibden plava. Redukcija ove molekule mjeri se apsorbancijom na 660 nm. Dakle, koncentracija ostataka cisteina i triptofana koja je reducirala Folin–Cioc alteu reagens daje ukupnu koncentraciju proteina u otopini.
Koje su sličnosti između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina?
- Bradford i Lowry proteinski testovi određuju koncentraciju proteina u otopini.
- Obje metode su kolorimetrijske metode.
- Također, osjetljivost obje metode je visoka.
Koja je razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina?
Bradford i Lowry proteinski test dvije su vrste testova koji određuju koncentraciju proteina u otopini. Bradfordov test proteina oslanja se na pomak apsorbancije boje Coomassie brilliant blue G-250 dok Lowry test proteina ovisi o reakciji bakrenih iona nastalih oksidacijom peptidnih veza, s Folin–Cioc alteu reagensom. Dakle, ovo je ključna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina. Bradford testu proteina potrebno je 15 minuta da bi se dobio rezultat, dok je Lowery testu proteina potrebno 40-60 minuta da bi se dobio rezultat. Dakle, ovo je još jedna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina. Nadalje, Bradfordov test proteina ovisi o sastavu aminokiselina dok Lowry test proteina djelomično ovisi o sastavu aminokiselina. Dakle, ovo je također razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina.
Dolje inforafik nudi više pojedinosti o razlici između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina.
Sažetak – Bradford vs Lowry proteinski test
Test je analitička tehnika koja se koristi za karakterizaciju glavne funkcionalne komponente uzorka. Bradford i Lowry proteinski test dvije su vrste proteinskih testova koji funkcioniraju pod kolorimetrijskim tehnikama. Oba testa proteina Bradford i Lowry određuju koncentraciju proteina u otopini. Međutim, ključna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina leži u kolorimetrijskoj tehnici koju koriste. Bradfordov test proteina koristi Coomassie brilliant blue G-250 dok Lowry test proteina koristi ione bakra (Cu+) i Folin-Cioc alteu reagens. Nadalje, Bradfordova metoda daje brze rezultate od Lowryjeve analize proteina. Međutim, obje su metode vrlo osjetljive metode i podložne su smetnjama raznih tvari.
