Ključna razlika – RPMI naspram DMEM
Većina istraživačkih studija uključuje uzgoj životinjskih stanica i stoga te studije zahtijevaju održavanje životinjskih staničnih linija u posebnim uvjetima rasta. Uzgoj životinjskih stanica široko se provodi u farmakološkim studijama za utvrđivanje metabolizma lijekova, u dijagnostici bolesti i istraživanju raka. Medij stanične kulture važan je aspekt kulture životinjskih stanica. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) i Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) dva su medija kulture koji se koriste u uzgoju životinjskih stanica. RPMI je medij koji se široko koristi za uzgoj stanica sisavaca u suspenzijskoj kulturi. DMEM je modificirana vrsta bazalne podloge, s povećanom koncentracijom aminokiselina i vitamina do četiri puta. DMEM se koristi u uzgoju stanica u prianjajućim kulturama. Ključna razlika između dva medija je tip kulture medija. RPMI se koristi na suspenzijskim kulturama, dok se DMEM koristi za uzgoj priraslih stanica.
Što je RPMI?
RPMI ili medij Roswell Park Memorial Institute također se naziva RPMI 1640. Naziv medija izveden je prema institutu u kojem je medij otkriven. Ovaj medij se obično koristi u kulturi životinjskih stanica, posebno za rast stanica sisavaca. Izvorno su razvijeni za uzgoj ljudskih limfocita.
Sljedeći sastojci uključeni su u RPMI.
- Glukoza
- pH indikator (fenol crveno)\
- Soli (natrijev klorid, natrijev bikarbonat, dinatrijev fosfat, kalijev klorid, magnezijev sulfat i kalcijev nitrat)
- Aminokiseline
- Vitamini (i-inozitol, kolin klorid, para-aminobenzojeva kiselina, folna kiselina, nikotinamid, piridoksin hidroklorid, tiamin hidroklorid, kalcijev pantotenat, biotin i riboflavin, cijanokobalamin)
Posebnost RPMI je povećana koncentracija fosfata u mediju. RPMI se koristi u atmosferi s 5% ugljičnog dioksida. To će osigurati maksimalne i optimalne uvjete za rast stanica. pH medija se održava na 8,0 sustavom bikarbonatnog puferiranja.
Slika 01: Kultura stanica na Petrijevoj zdjelici
Primjene RPMI u uzgoju stanica
- Uzgoj ljudskih T i B limfocita, stanica koštane srži i hibridoma.
- Koristi se za proučavanje ljudskih neoplastičnih stanica.
Što je DMEM?
Dulbeccov modificirani Eagleov medij (DMEM) je modificirani medij koji se komercijalno priprema. Izvorna tekstura srednjeg pudera je žuta. U DMEM-u se koncentracija vitamina povećava do četiri puta, čime se povećava sadržaj hranjivih tvari u mediju.
DMEM je također modificiran dodavanjem više soli kao što su željezni nitrat, natrijev piruvat i neke neesencijalne aminokiseline kao što su serin i glicin. Formulacija glukoze u mediju je također promijenjena. Izvorna formulacija sastoji se od 1000 mg/L glukoze, dok je u DMEM koncentracija povećana do 4500 mg/L. DMEM također zahtijeva nadopunu serumskog medija jer nije potpuni medij. Najčešće se DMEM nadopunjuje fetalnim goveđim serumom (FBS). FBS osigurava potrebne proteine i faktore rasta za proces uzgoja.
PH medija varira ovisno o dodatku natrijevog bikarbonata. pH medija prije dodavanja natrijevog bikarbonata je oko 6,80 – 7,40, dok je pH nakon dodavanja natrijevog bikarbonata u rasponu od 7,60 – 8,20. Temperatura skladištenja medija je 2 – 8 0C.
Slika 02: DMEM
Primjene DMEM
- Proučiti sposobnost stvaranja plakova poliomavirusa u stanicama mišjih embrija.
- U studijama kontaktne inhibicije.
- U istraživanju i analizi kultura pilećih stanica.
Koje su sličnosti između RPMI i DMEM?
- I RPMI i DMEM koriste se u kulturi životinjskih stanica.
- I RPMI i DMEM mediji su tekuće formulacije.
- I RPMI i DMEM mediji sadrže esencijalne aminokiseline, vitamine i anorganske soli potrebne za rast.
- I RPMI i DMEM mediji su nepotpuni. Stoga treba dodati serum.
- I RPMI i DMEM mediji koriste glukozu kao izvor ugljika.
- I RPMI i DMEM mediji imaju viši pH.
Koja je razlika između RPMI i DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI je medij koji se široko koristi za uzgoj stanica sisavaca u suspenzijskoj kulturi. | DMEM je modificirana vrsta bazalne podloge s povećanom koncentracijom aminokiselina i vitamina. |
| Prisutnost dodatnih fosfata | |
| Prisutno u RPMI. | Odsutan u DMEM. |
| Koristite | |
|
Koristi se za uzgoj stanica u vezanim kulturama. Koristi se za,
|
| Vrste kulture | |
| RPMI se koristi za suspenzijske kulture. | DMEM se koristi za kulture s priljepljenim stanicama. |
Sažetak – RPMI vs DMEM
I RPMI i DMEM naširoko se koriste u uzgoju životinjskih stanica, posebno za uzgoj životinjskih staničnih linija uključujući limfocite in vitro. DMEM je modificirani bazalni medij gdje postoji povećana koncentracija hranjivih tvari. RPMI je razvio Roswell Park Memorial Institute, a također je medij koji se koristi u uzgoju životinjskih stanica, posebno za limfocite sisavaca. Oba medija su komercijalno dostupna. Ovo je razlika između RPMI i DMEM.
