Ključna razlika – DMEM naspram EMEM
Uzgoj životinjskih stanica provodi se kako bi se održale životinjske stanične linije u svrhu provođenja mnogih istraživačkih aktivnosti. Životinjske stanične linije održavaju se u sterilnim uvjetima i zahtijevaju posebne tehnike. Koriste se u studijama o proizvodnji cjepiva, za utvrđivanje ponašanja stanice prema karcinogenima i mutagenima te u istraživanju raka. Medij stanične kulture vrlo je važan za uspjeh uzgoja životinjskih stanica. Postoje različite vrste medija za stanične kulture kao što su Dulbeccov modificirani Eagleov medij (DMEM) i Eagleov minimalni esencijalni medij (EMEM). DMEM je modificirani bazalni medij s povećanim koncentracijama aminokiselina i vitamina do četiri puta. To također uključuje neke dodatne zamjene koje povećavaju hranjive uvjete medija. EMEM je jedan od prvih tipova medija za uzgoj životinjskih stanica koje je razvio Harry Eagle. To je jednostavan, bazalni medij s minimalnim količinama hranjivih tvari. Ključna razlika između dva medija je sastav hranjivih tvari. EMEM se sastoji od minimalnih koncentracija hranjivih tvari potrebnih za rast kulture, dok je DMEM vrlo složen medij s povećanim koncentracijama aminokiselina i vitamina.
Što je DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je vrsta modificiranog medija koji se komercijalno priprema kao kremasto bijeli prah. Ovo je prilagođeno iz EMEM-a, a sastav hranjivih tvari modificiran je povećanjem koncentracije aminokiselina i vitamina. Koncentracija aminokiselina je povećana do dva puta u usporedbi s bazalnim medijem. Koncentracija vitamina se povećava do četiri puta čime se povećava sadržaj hranjivih tvari u mediju.
DMEM je također modificiran dodavanjem više soli kao što su željezni nitrat, natrijev piruvat i neke neesencijalne aminokiseline kao što su serin i glicin. Također se mijenja koncentracija glukoze u mediju. Izvorna formulacija sastoji se od 1000 mg/L glukoze, dok je u DMEM koncentracija povećana do 4500 mg/L. DMEM također zahtijeva nadopunu serumskog medija jer nije potpuni medij. Najčešće se DMEM nadopunjuje fetalnim goveđim serumom (FBS). FBS osigurava potrebne proteine i faktore rasta za proces uzgoja.
PH medija varira ovisno o dodatku natrijevog bikarbonata. pH medija prije dodavanja natrijevog bikarbonata je oko 6,80 – 7,40, dok je pH nakon dodavanja natrijevog bikarbonata u rasponu od 7,60 – 8,20. Temperatura skladištenja medija je 2 – 8 0C.
Slika 01: DMEM
Primjene DMEM
- Proučiti sposobnost stvaranja plakova poliomavirusa u stanicama mišjih embrija.
- U studijama kontaktne inhibicije
- U kulturama kokošjih stanica
Što je EMEM?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) jedan je od prvih razvijenih medija u uzgoju stanica životinjskih staničnih linija. Prve vrste životinjskih staničnih linija uzgojene pomoću EMEM-a uključuju mišje L stanice i HeLa stanice. EMEM medij također je vrsta modificiranog medija. Harry Eagle prvi je formulirao medij EMEM. EMEM mediji su uključivali esencijalne aminokiseline i vitamine u minimalnoj koncentraciji potrebnoj za vrste stanica. Neesencijalne aminokiseline nisu uključene u formulaciju, a koncentracije glukoze i natrijevog bikarbonata su smanjene. Iako je medij sadržavao uravnoteženu količinu minimalnih zahtjeva rasta za uspješan rast stanica.
EMEM nije potpuni medij. Stoga je za uspješan rast stanica sisavaca potrebna nadopuna serumom. EMEM se koristi na velikom broju stanica i još uvijek je popularan medij među istraživačima staničnih kultura.
Koje su sličnosti između DMEM i EMEM?
- Obje vrste medija koriste se u kulturi životinjskih stanica.
- Obje vrste medija su tekuće formulacije.
- Obje vrste medija su modificirani mediji iz bazalnog medija.
- Obje vrste medija sadrže esencijalne aminokiseline, vitamine i anorganske soli koje su potrebne za rast.
- Obje vrste medija su nepotpune. Stoga treba dodati serum.
- Obje vrste medija koriste glukozu kao izvor ugljika.
- Obje vrste medija imaju viši pH i podešavaju se dodavanjem natrijevog bikarbonata.
Koja je razlika između DMEM i EMEM?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM je modificirana vrsta bazalne podloge, s povećanom koncentracijom aminokiselina i vitamina. Ovo također uključuje neke dodatne zamjene koje povećavaju hranjive uvjete podloge. | EMEM je jedan od prvih tipova medija za uzgoj životinjskih stanica koje je razvio Harry Eagle. To je jednostavan, bazalni medij s minimalnim količinama hranjivih tvari. |
| Modifikacije aminokiselina | |
| Koncentracija aminokiselina porasla je do dva puta u DMEM mediju. | U EMEM-u se koristi minimalna koncentracija aminokiselina. |
| Modifikacije vitamina | |
| Koncentracija vitamina povećala se do četiri puta u DMEM. | U EMEM-u se koristi minimalna koncentracija vitamina. |
| Koncentracija glukoze | |
| Koncentracija glukoze porasla je do 4500 mg/L u DMEM. | Koncentracija glukoze je 1000 mg/L u EMEM. |
| Prisutnost neesencijalnih aminokiselina | |
| Prisutni u DMEM. | Odsutan u EMEM-u. |
| Prisutnost dodatnih komponenti | |
| Komponente poput željeznog nitrata, natrijevog piruvata prisutne su u DMEM. | EMEM sadrži minimalnu količinu hranjivih tvari. |
Sažetak – DMEM vs EMEM
DMEM i EMEM dva su popularna medija za uzgoj životinjskih stanica koji se uglavnom razlikuju po sastavu hranjivih tvari. DMEM je modificirani oblik EMEM-a, gdje se koncentracije hranjivih tvari povećavaju uz dodatak nekih novih komponenti. EMEM je minimalni medij i sadrži sve bitne čimbenike potrebne za uspješan rast životinjskih staničnih linija. Ovi mediji trebaju se koristiti u visoko sterilnim uvjetima, a oba medija treba nadopuniti serumom prije upotrebe. Ovo je razlika između DMEM i EMEM.
Preuzmite PDF DMEM vs EMEM
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti ga za izvanmrežne svrhe prema napomeni o citatu. PDF verziju preuzmite ovdje. Razlika između DMEM i EMEM
