Ključna razlika između Elise i Elispota je u tome što je Elisa imunoenzimski test koji određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina, dok je Elispot imunoenzimski test koji otkriva pojedinačne stanice koje izlučuju citokine.
Elisa i Elispot dva su enzimski vezana imunološka ispitivanja koja se široko koriste u medicini, biljnoj patologiji, biotehnologiji i različitim farmaceutskim industrijama. U ovim tehnikama, proteinski analit detektira se antitijelom usmjerenim protiv njega. Elisa je najpopularnija enzimski imunoanaliza koja se koristi u laboratorijima. S druge strane, Elispot je enzimski imunološki test koji se ne koristi umjesto Elise, već se koristi kao dodatak Elisi u laboratorijima.
Što je Elisa test?
Elisa je enzimski imunoanaliza koja određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina. To je naširoko korišten analitički biokemijski test koji su prvi opisali Engvall i Perlmann 1971. godine. Ova tehnika koristi tip enzimskog imunološkog testa čvrste faze za otkrivanje prisutnosti specifičnog proteina u tekućem uzorku pomoću protutijela usmjerenih protiv tog specifičnog proteina. Ovaj je test često korišten dijagnostički alat u medicini, biljnoj patologiji i biotehnologiji.
Mehanizam ELISA testa
U većini ELISA testova, nepoznata količina antigena imobilizira se na čvrstu podlogu (mikrolitarsku ploču) na početku. Zatim se odgovarajuće primarno antitijelo nanosi preko čvrste potporne površine. Ovo antitijelo stvara kompleks s antigenom (kompleks antigen-antitijelo). Primarno antitijelo vezano na antigen može se otkriti sekundarnim antitijelom koje je povezano s enzimom biokonjugacijom. U završnom koraku Elisa testa dodaje se tvar koja sadrži supstrat enzima. Ako postoji pravilno vezanje primarnog protutijela na antigen, supstrat proizvodi vidljivu promjenu boje. U konačnici, ovo kvantificira antigen u uzorku.
Slika 01: Različite vrste Elise
Nadalje, postoje različiti pristupi Elisi, kao što su izravna Elisa i neizravna Elisa. Trenutno se različiti Elisa testovi koriste za otkrivanje ljudskih patogena kao što su Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus hepatitisa B, virus hepatitisa C, E.coli koja proizvodi enterotoksin, HIV i SARS-CoV-2.
Što je Elispot test?
Elispot je enzimski imunološki test koji otkriva pojedinačne stanice koje izlučuju citokine. Cecil Czerkinsky prvi je opisao ELISpot 1983. To je vrsta testa koji se usredotočuje na kvantitativno mjerenje učestalosti lučenja citokina za jednu stanicu. Također se klasificira kao tehnika koja koristi antitijela za otkrivanje biološkog ili kemijskog proteinskog analita. Fluorospot test je varijacija Elispot testa, koji koristi fluorescenciju za analizu višestrukih analita (tajnovitijih proteina).
Mehanizam Elispot testa
U ovom mehanizmu, monoklonska protutijela specifična za citokine se prvo dodaju u jažice mikrolitarskih ploča. Zatim se željene stanice koje se promatraju dodaju u jažice. Kasnije se stanice inkubiraju. Tijekom stanične inkubacije, stanicama je dopušteno da reagiraju na bilo koji podražaj i luče citokin. Citokini koje izlučuju inkubirane stanice pričvrstit će se za antitijela jer su stanice okružene monoklonskim antitijelima specifičnim za citokine.
Slika 02: Elispot test
Da bi se otkrila ova monoklonska antitijela specifična za citokine, u jažicu se dodaju biotinilirana specifična antitijela za detekciju. Biotinilirana specifična antitijela za otkrivanje hvataju monoklonska antitijela specifična za citokine u jažicama. Štoviše, konjugati streptavidina i enzima dodaju se u jažice kako bi se vezali s antitijelima za otkrivanje. U završnom koraku, specifični supstrati se dodaju u jažice. Reakcije enzimskih konjugata i supstrata proizvode jasne mrlje u jažicama. Ove se različite točke očitavaju na automatiziranom ELISpot čitaču. U konačnici, ovo će dodatno izračunati učestalost lučenja citokina.
Koje su sličnosti između Elise i Elispot?
- Oboje su enzimski imunoanalize.
- Oba testa otkrivaju specifične proteinske analite.
- Ovi testovi koriste specifična antitijela za identifikaciju proteinskih analita.
- Oba testa koriste enzime i supstrate.
- Koriste se kao dijagnostički alat u medicinskim laboratorijima.
Koja je razlika između Elise i Elispot?
Elisa je enzimski imunoanaliza koja određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina. S druge strane, Elispot je enzimski imunološki test koji mjeri pojedinačne stanice koje luče citokine. Dakle, ovo je ključna razlika između Elise i Elispota. Štoviše, u testu Elisa, antigen se prvo imobilizira na mikrolitarske jažice. Nasuprot tome, u Elispot testu, antitijelo se prvo imobilizira na mikrolitarske jažice. Dakle, ovo je još jedna razlika između Elise i Elispot.
Infografika u nastavku predstavlja detaljnu analizu razlike između Elise i Elispota u obliku tablice.
Sažetak – Elisa vs Elispot
Elisa i Elispot dva su enzimski vezana imunološka ispitivanja koja se široko koriste u medicini, biljnoj patologiji, biotehnologiji i različitim farmaceutskim industrijama. Elisa detektira prisutnost liganda (proteina) u tekućem uzorku pomoću protutijela usmjerenih protiv liganda koji se mjeri. Elispot test široko je korištena metoda za praćenje imunoloških odgovora. Otkriva pojedinačne stanice koje luče citokine pomoću protutijela. To je i imunotest i tehnika biološkog testa. Dakle, ovo je sažetak razlike između Elise i Elispot.
