Ključna razlika između fluorescentne mikroskopije i konfokalne mikroskopije je u tome što je kod fluorescentne mikroskopije cijeli uzorak ravnomjerno obasjan svjetlom iz izvora svjetlosti, dok su kod konfokalne mikroskopije samo neke točke uzorka izložene svjetlu iz izvor svjetlosti.
Fluorescencijska mikroskopija je važna analitička tehnika koja je korisna u proučavanju svojstava organskih ili anorganskih tvari. Konfokalna mikroskopija je analitička tehnika korisna za povećanje optičke razlučivosti i kontrasta mikrofotografije pomoću prostorne rupice za blokiranje svjetlosti izvan fokusa u formiranju slike.
Što je fluorescentna mikroskopija?
Fluorescencijska mikroskopija je važna analitička tehnika koja je korisna u proučavanju svojstava organskih ili anorganskih tvari. Instrument koji koristimo za ovo mjerenje je fluorescentni mikroskop. To je vrsta optičkog mikroskopa. Ova vrsta optičkog mikroskopa koristi fluorescenciju umjesto raspršenja, refleksije, prigušenja i apsorpcije ili uz njih.
Fluorescencijski mikroskop koristi fluorescenciju za stvaranje slike. To može biti jednostavna postavka poput epifluorescentnog mikroskopa ili kompliciraniji dizajn, uključujući konfokalni mikroskop koji koristi optičko rezanje. Ovo pomaže u dobivanju bolje rezolucije fluorescentne slike.
Slika 01: Fluorescentni mikroskop
Kada razmatramo princip fluorescentne mikroskopije, trebali bismo koristiti uzorak za osvjetljavanje svjetlom određene valne duljine. Tamo uzorak apsorbira svjetlost pomoću fluorofora zbog čega oni emitiraju svjetlost dužih valnih duljina. Važno je odvojiti osvijetljenu svjetlost od mnogo slabije emitirane fluorescencije upotrebom filtera spektralne emisije.
Uobičajeno, fluorescentni mikroskop sadrži izvor svjetlosti, ekscitacijski filtar, dikroično zrcalo i emisijski filtar. Izvor svjetlosti može biti ksenonska lučna lampa, žarulja sa živinom parom, LED diode i laseri. Dikroično zrcalo je također poznato kao dikroični djelitelj zraka.
Što je konfokalna mikroskopija?
Konfokalna mikroskopija je analitička tehnika korisna za povećanje optičke razlučivosti i kontrasta mikrofotografije pomoću prostorne rupice za blokiranje svjetlosti izvan fokusa u formiranju slike. Također je poznata kao konfokalna laserska skenirajuća mikroskopija ili laserska konfokalna skenirajuća mikroskopija. To je tehnika optičkog snimanja.
U ovoj mikroskopskoj tehnici, snimanje više 2D slika na različitim dubinama u uzorku omogućuje rekonstrukciju 3D struktura unutar objekta. Konfokalna mikroskopska tehnika vrlo je korisna u znanstvenim i industrijskim zajednicama. Obično se koristi u znanostima o životu, inspekciji poluvodiča i znanosti o materijalima.
Slika 02: Princip senzora konfokalne točke iz Minskyjevog patenta
Tijekom procesa, svjetlost putuje kroz uzorak pod konvencionalnim mikroskopom koliko god može prodrijeti u uzorak, dok konfokalni mikroskop koji fokusira samo manji snop svjetlosti prolazi kroz usku dubinsku razinu odjednom. Ovu tehniku je razvio Marvin Minsky 1957.
Koja je razlika između fluorescentne mikroskopije i konfokalne mikroskopije?
Fluorescencijska mikroskopija je važna analitička tehnika koja je korisna u proučavanju svojstava organskih ili anorganskih tvari. Konfokalna mikroskopija je analitička tehnika korisna za povećanje optičke razlučivosti i kontrasta mikrofotografije pomoću prostorne rupice za blokiranje svjetlosti izvan fokusa u formiranju slike. Ključna razlika između fluorescentne mikroskopije i konfokalne mikroskopije je u tome što je u fluorescentnoj mikroskopiji cijeli uzorak ravnomjerno obasjan svjetlom iz izvora svjetlosti, dok su u konfokalnoj mikroskopiji samo neke točke uzorka izložene svjetlu iz izvora svjetlosti.
Infografika u nastavku predstavlja razlike između fluorescentne mikroskopije i konfokalne mikroskopije u tabličnom obliku za usporedbu.
Sažetak – fluorescentna mikroskopija u odnosu na konfokalnu mikroskopiju
Fluorescencijska mikroskopija i konfokalna mikroskopija dvije su analitičke tehnike uključene u optičko snimanje. Ključna razlika između fluorescentne mikroskopije i konfokalne mikroskopije je u tome što je u fluorescentnoj mikroskopiji cijeli uzorak ravnomjerno obasjan svjetlom iz izvora svjetlosti, dok su u konfokalnoj mikroskopiji samo neke točke uzorka izložene svjetlu iz izvora svjetlosti.
