Ključna razlika između UV vis i fluorescentne spektroskopije je u tome što UV-vidljiva spektroskopija mjeri apsorpciju svjetlosti u UV-vidljivom rasponu, dok fluorescentna spektroskopija mjeri svjetlost koju emitira uzorak u fluorescentnom rasponu nakon apsorpcije svjetlosti na veća energija od razine emitirane energije.
Spektroskopija je tehnika za mjerenje apsorpcije i emisije svjetlosti i drugog zračenja od strane tvari.
Što je UV Vis spektroskopija?
UV vidljiva spektroskopija je analitička tehnika koja koristi apsorpciju ili refleksiju dijela UV raspona i kompletnih susjednih vidljivih područja elektromagnetskog spektra. Ova tehnika postoji u dvije vrste; to su apsorpcijska spektroskopija i spektroskopija refleksije. Koristi svjetlo u vidljivom i susjednom rasponu.
Općenito, apsorpcija ili refleksija vidljivog raspona svjetlosti može izravno utjecati na percipiranu boju kemikalija koje su uključene u proces. U ovom rasponu spektra možemo primijetiti da atomi i molekule mogu proći kroz elektronske prijelaze. Ovdje je apsorpcijska spektroskopija komplementarna fluorescentnoj spektroskopiji, gdje se fluorescencija bavi prijelazima elektrona iz pobuđenog stanja u osnovno stanje. Osim toga, apsorpcija mjeri prijelaze iz osnovnog stanja u pobuđeno stanje.
Slika 01: UV vidljiva spektroskopija
Ova spektroskopska tehnika korisna je u kvantitativnoj analizi različitih uzoraka, kao što su ioni prijelaznih metala, visoko konjugirani organski spojevi i makromolekule u biološkim sustavima. Općenito, spektroskopska analiza se provodi pomoću otopina, ali također možemo koristiti krutine i plinove.
Što je fluorescentna spektroskopija?
Fluorescencijska spektroskopija je vrsta elektromagnetske spektroskopije koja je korisna u analizi fluorescencije iz uzorka. Ova tehnika uključuje upotrebu zrake svjetlosti (kao što je UV) za pobuđivanje elektrona u molekulama nekih spojeva, što može uzrokovati njihovo emitiranje svjetlosti. Obično je to zračenje vidljiva svjetlost, ali ne nužno ista.
Slika 02: Fluorescencijska spektroskopija
Molekule obično imaju različita stanja koja su poznata kao energetske razine. Ova tehnika prvenstveno se bavi elektroničkim i vibracijskim stanjima. Često uzorak analita ima molekule u osnovnom elektronskom stanju i pobuđenom stanju više energije. Ova dva elektronska stanja imaju različita vibracijska stanja između sebe. Tijekom procesa fluorescencije, kemijske vrste se pobuđuju apsorbiranjem fotona i prelaze iz osnovnog stanja na višu energetsku razinu. Nakon toga, sudari između drugih molekula uzrokuju da pobuđene molekule izgube vibracijsku energiju sve dok iz ovog pobuđenog stanja ne dođu u stanje niske vibracije. Ovo emitira fotone s različitim energijama i različitim frekvencijama. To se zove fluorescencija. Možemo analizirati ove različite frekvencije emitirane na ovaj način kako bismo odredili različite vibracijske razine.
Koja je razlika između UV Vis i fluorescentne spektroskopije?
Spektroskopske tehnike korisne su u proučavanju svojstava različitih kemijskih tvari. Ključna razlika između UV vis i fluorescentne spektroskopije je u tome što UV-vidljiva spektroskopija mjeri apsorpciju svjetlosti u UV-vidljivom rasponu, dok fluorescentna spektroskopija mjeri svjetlost koju emitira uzorak u fluorescentnom rasponu nakon apsorpcije svjetlosti pri višoj energiji od emitirane razina energije. Štoviše, fluorescentna spektroskopija je osjetljivija od UV-vidljive spektroskopije.
Infografija u nastavku predstavlja razlike između UV vis i fluorescentne spektroskopije u obliku tablice za usporedbu.
Sažetak – UV Vis naspram fluorescentne spektroskopije
Spektroskopija je važna analitička tehnika. Postoje različite vrste spektroskopija, poput IR spektroskopije, UV vidljive spektroskopije, fluorescentne spektroskopije itd. Ključna razlika između UV vis i fluorescentne spektroskopije je u tome što UV-vidljiva spektroskopija mjeri apsorpciju svjetlosti u UV-vidljivom rasponu, dok fluorescentna spektroskopija mjeri svjetlost koju emitira uzorak u području fluorescencije nakon apsorpcije svjetlosti pri višoj energiji od razine emitirane energije.
