Ključna razlika – imunocitokemija naspram imunohistokemije
Imunocitokemija (ICC) i imunohistokemija (IHC) dvije su široko korištene tehnike u molekularnoj dijagnostici, koje identificiraju i potvrđuju pojavu i nezaraznih i zaraznih bolesti na temelju molekularnih markera prisutnih na stanicama. Ključna razlika između imunocitokemije i imunohistokemije je molekula koja se koristi kao postupak analize u ovim tehnikama. U ICC se koriste primarna i sekundarna antitijela konjugirana s markerima kao što je fluorescencija, dok se IHC, monoklonska i poliklonska antitijela koriste za dijagnostička određivanja.
Što je imunocitokemija (ICC)?
ICC koristi primarna i sekundarna antitijela vezana za markere kao što su fluorescentni markeri ili enzimi i moćna je metoda otkrivanja antigena prisutnih na ciljnim stanicama koje mogu biti zarazne stanične čestice ili stanice kancerogenog tumora. Za imunocitokemiju potrebne su tri vrste kontrola.
- Primarno antitijelo – kontrola koja pokazuje specifičnost vezanja primarnog antitijela na antigen
- Sekundarno antitijelo – kontrola koja pokazuje da je oznaka specifična za primarno antitijelo
- Kontrole oznaka – pokazuju da je označavanje rezultat dodane oznake, a ne rezultat endogenog označavanja.
Slika 01: Imunocitokemija označava pojedinačne proteine unutar stanica (ovdje je tirozin hidroksilaza u aksonima simpatičkih autonomnih neurona prikazana zelenom bojom).
Primarna kontrola antitijela je specifična za svako novo antitijelo i ne može se ponoviti za svaki eksperiment. Sekundarna kontrola antitijela dizajnirana je na temelju primarnog antitijela korištenog u eksperimentu i uključena je u svaki eksperiment. Kontrola označavanja je uključena ako se promijeni uvjet postupka, uzorak ili kada se pronađe neočekivano označavanje.
Dvije glavne primjene ICC-a su radioimunotest (RIA) i enzimski imunotest (ELISA). Najčešće korišteno antitijelo je imunoglobulin G.
Što je imunohistokemija (IHC)?
U imunohistokemiji, izvorni uzorak sadrži monoklonska i poliklonska antitijela kako bi se odredila prisutnost antigena u stranim stanicama. Ova tehnika temelji se na specifičnoj reakciji vezanja antigen-antitijelo. Protutijela koja se koriste u detekciji mogu se označiti različitim markerima; mogu biti fluorescentni markeri, radioaktivno obilježeni markeri ili kemijski markeri. Kroz olakšavanje in vitro vezanja između antigena i ciljanog antitijela, može se odrediti prisutnost ili odsutnost određenog proteina u stanici.
Slika 02: Imunohistokemijsko bojenje normalnog bubrega s CD10
Trenutno su znanstvenici uključeni u razvoj ciljanih antitijela za specifične antigene prisutne u stanicama koje se mogu razviti ili kao maligne tumorske stanice ili antigene prisutne u uzročnicima infekcije kao što je HIV.
Koje su sličnosti između imunocitokemije i imunohistokemije?
- Reakcije su vrlo specifične i točne kod ICC i IHC.
- Primjene ICC i IHC uključuju dijagnostiku raka i zaraznih bolesti.
- Treba održavati sterilne uvjete u oba stanja, a treba ih izvesti in vitro
- Obje tehnike daju ponovljive rezultate.
- Obje su brze.
- Radiooznačavanje, tehnike fluorescencije koriste se kao metode detekcije u ICC i IHC.
- Obje se temelje na uparivanju antigen-antitijelo.
Koja je razlika između imunocitokemije i imunohistokemije?
Imunocitokemija (ICC) protiv imunohistokemije (IHC) |
|
| ICC koristi primarne i sekundarne markere vezane za antitijela kao što su fluorescentni markeri ili enzimi i moćna je metoda detekcije za otkrivanje antigena prisutnih na ciljnim stanicama. | IHC je metoda koja koristi monoklonska i poliklonska protutijela za određivanje prisutnosti antigena koji su posebni proteinski markeri smješteni na površini stanica. |
| Izvor uzorka | |
| Uzorci dobiveni iz tkiva koja su histološki obrađena u tanke rezove koriste se u ICC-u. | IHC koristi uzorke koji se sastoje od stanica uzgojenih u jednom sloju ili stanica u suspenziji koje su položene na stakalce. |
| Obrada uzorka | |
| U ICC-u, stanice bi trebale biti propusne kako bi se olakšao prodor protutijela do unutarstaničnih ciljeva. | U IHC-u, stanice su fiksirane formalinom, umetnute u parafin prije bojenja. |
Sažetak – imunocitokemija vs imunohistokemija
Molekularna dijagnostika koristi se za identifikaciju i potvrdu pojave i nezaraznih i zaraznih bolesti na temelju molekularnih markera prisutnih na stanicama. Molekularni markeri mogu biti proteini ili sekvence DNA ili RNA; Razvoj tehnologija kao što su ICC i IHC otvorio je put znanstvenicima za prepoznavanje bolesti i njezinog uzroka u ranoj fazi. I ICC i IHC ovise o specifičnim reakcijama između antitijela i antigena iako je izvor uzorka. Glavna razlika između imunocitokemije i imunohistokemije je obrada uzorka u dva postupka.
Preuzmi PDF verziju Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti ga za izvanmrežne svrhe prema napomeni o citatu. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između imunocitokemije i imunohistokemije.
