Ključna razlika – TLC naspram HPTLC
TLC i HPTLC dvije su kemijske tehnike koje se koriste za odvajanje nehlapljivih komponenti u smjesi. Ključna razlika između TLC i HPTLC je u tome što upijajući materijal u TLC ploči ima velike čestice, dok HPTLC ploče imaju vrlo male čestice upijajućeg materijala.
TLC je tankoslojna kromatografija. HPTLC je tankoslojna kromatografija visoke učinkovitosti, koja je napredna tehnika u usporedbi s TLC metodom.
Što je TLC?
TLC ili tankoslojna kromatografija je osnovna kemijska tehnika koja se koristi za odvajanje nehlapljivih komponenti u smjesi. Ovaj eksperiment se provodi pomoću listova stakla, plastike ili papira. Ova ploča je presvučena tankim slojem celuloze ili silika gela (apsorbirajući materijal). Ovaj tanki sloj poznat je kao stacionarna faza TLC-a. List je poznat kao TLC ploča.
Prije eksperimenta, osnovna i gornja linija označene su olovkom na TLC ploči. Potom se uzduž te linije uzorkuje pomoću kapilarne cijevi. Nakon toga se TLC ploča postavi okomito u mobilnu fazu. Mobilna faza je otapalo (ili mješavina otapala) stavljeno u spremnik. Prilikom postavljanja TLC ploče u ovu mobilnu fazu, potrebno je držati osnovnu liniju iznad ruba otapala. Inače će se uzorak otopiti u otapalu.
TLC ploča neko vrijeme može ostati u mobilnoj fazi. Zatim, s vremenom, mobilna faza se podiže prema ploči zbog kapilarnog djelovanja. Ako je uzorak topiv u mobilnoj fazi, dići će se prema gore zajedno s mobilnom fazom.
Načelo “slično se otapa slično” stoji iza ove TLC metode. To znači da se polarni spojevi otapaju u polarnim otapalima, dok se nepolarni spojevi otapaju u nepolarnim otapalima. Stacionarna faza je obično silikagel ili celuloza, koja je polarni spoj. Mobilna faza koja se koristi je nepolarno otapalo kao što je heksan. Stoga, ako uzorak sadrži bilo kakve nepolarne komponente, te će komponente migrirati prema gore zajedno s mobilnom fazom. Polarne komponente će se zalijepiti za ploču. Među pokretnim komponentama, umjereno nepolarni spojevi će migrirati sporo, dok će visoko nepolarni spojevi migrirati brzo. Kada fronta otapala dosegne gornju liniju TLC ploče, ploča se izvadi i ostavi da se osuši.
Slika 01: TLC tehnika
Ako su komponente u uzorku obojeni spojevi, na ploči bi se trebale nalaziti šarene mrlje na različitim mjestima. Ali ako su komponente bezbojne, treba koristiti neke druge tehnike; na primjer, raspršivanje ninhidrina za otkrivanje amonijaka ili amina (primarni amini i sekundarni amini).
Što je HPTLC?
HPTLC ili tankoslojna kromatografija visoke učinkovitosti je napredni oblik tankoslojne kromatografije (TLC). Razlučivost i točnost HPTLC-a su vrlo visoke. Većina koraka ove tehnike može se automatizirati.
Ploče koje se koriste u HPTLC sadrže čestice silikagela vrlo male veličine, a gustoća pakiranja gela na ploči je velika. Površina ploče je glatka i omogućuje učinkovito odvajanje. Analiza je brža od TLC tehnike. Osjetljivost ove metode je također visoka. U HPTLC, nekoliko različitih uzoraka može se odvojiti u istoj ploči bez ikakvog koraka pripreme uzorka.
Koja je razlika između TLC i HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC je tankoslojna kromatografija. | HPTLC je tankoslojna kromatografija visoke učinkovitosti. |
| Tehnika | |
| To je osnovna kemijska tehnika koja se koristi za odvajanje nehlapljivih komponenti u smjesi. | To je napredni oblik tankoslojne kromatografije (TLC). |
| Tanjur | |
| TLC ploča može biti izrađena od papira, plastike ili stakla na koje se nanosi adsorpcijski materijal koji ima velike čestice. | HPTLC ploče imaju vrlo male čestice upijajućeg materijala. |
| Rezolucija | |
| TLC metoda daje lošu rezoluciju kada uzorak ima komponente sličnih svojstava. | HPTLC metoda daje visoku rezoluciju. |
| Vrijeme | |
| TLC tehnika je dugotrajna tehnika. | HPTLC daje rezultate većom brzinom od TLC metode. |
Sažetak – TLC naspram HPTLC
HPTLC je napredni oblik TLC-a. Ključna razlika između TLC i HPTLC je u tome što TLC ploča može biti izrađena od papira, plastike ili stakla na koje se nanosi adsorbirajući materijal s velikim česticama, dok HPTLC ploče imaju vrlo male čestice adsorbirajućeg materijala.
