Ključna razlika između ionske izmjene i kromatografije isključenja veličine je u tome što se kromatografija ionske izmjene koristi za analizu ionskih tvari prema naboju, dok se kromatografija isključenja veličine koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
Kromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih smjesa. Kromatografske tehnike imenovane su prema parametru koji se koristi za analizu tvari – npr. kromatografija isključenja veličine, kromatografija ionske izmjene, itd.
Što je kromatografija ionske izmjene?
Kromatografija ionske izmjene je analitička tehnika kojom možemo analizirati ionske tvari. Često je korisno analizirati anorganske anione i katione (tj. kloridne i nitratne anione te katione kalija i natrija). Iako to nije vrlo uobičajena metoda, pomoću nje možemo analizirati organske ione. Štoviše, ovu tehniku možemo koristiti za pročišćavanje proteina jer su proteini nabijene molekule pri određenim pH vrijednostima. Ovdje koristimo čvrstu stacionarnu fazu na koju se nabijene čestice mogu vezati. Na primjer, možemo koristiti kopolimere smole polistiren-divinilbenzen kao čvrstu podlogu.
Slika 01: Teorija iza kromatografije ionske izmjene
Da bismo ovo dodatno objasnili, stacionarna faza ima fiksirane ione kao što su sulfatni anioni ili kvarterni aminski kationi. Svaki od njih trebao bi se povezati s protuionom (ionom suprotnog naboja) ako želimo održati neutralnost ovog sustava. Ako je protuion kation, tada sustav nazivamo kationska izmjenjivačka smola. Ali, ako je protuion anion, sustav je smola za anionsku izmjenu. Štoviše, postoji pet glavnih koraka u kromatografiji ionske izmjene:
- Početni stadij
- Adsorpcija mete
- Početak ispiranja
- Kraj elucije
- Regeneracija
Što je kromatografija isključivanja veličine?
Kromatografija isključenja veličine ili SEC analitička je tehnika u kojoj se molekule u smjesi mogu razdvojiti prema veličini i molekularnoj težini. Obično radi s velikim molekulama koje se nazivaju makromolekule. Obično se za analizu koristi vodena otopina. Tada se naziva gel filtracijska kromatografija. Kada je organsko otapalo, naziva se gel permeaciona kromatografija.
Gel filtracijska kromatografija je oblik kromatografije za isključivanje veličine u kojoj koristimo vodenu otopinu kao mobilnu fazu. Stoga je mobilna faza koju često koristimo u ovoj tehnici vodeni pufer. Također, za ovo odvajanje koristimo kromatografsku kolonu, a kolonu trebamo napuniti poroznim kuglicama. Obično su Sephadex i agaroza korisni kao porozni materijal. Stoga je ovaj materijal stacionarna faza našeg eksperimenta. Štoviše, možemo koristiti veličinu pora ovih kuglica da odredimo veličinu makromolekula koje odvajamo. Međutim, to je samo procjena.
Slika 02: Aparat za kromatografiju isključivanja veličine
Gel permeacijska kromatografija je oblik kromatografije za isključivanje veličine u kojoj koristimo organsko otapalo kao mobilnu fazu. Stoga u tu svrhu možemo koristiti otopine poput heksana i toluena. Stacionarna faza je porozan materijal, isto kao u gel filtracijskoj kromatografiji. Ova se tehnika često primjenjuje na polimere i druge materijale topive u organskim tvarima. Metoda djelovanja ove tehnike slična je onoj kod gel filtracijske kromatografije.
Koja je razlika između ionske izmjene i kromatografije isključenja veličine?
Kromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih smjesa. Ključna razlika između ionske izmjene i kromatografije isključenja veličine je u tome što se kromatografija ionske izmjene koristi za analizu ionskih tvari prema naboju, dok se kromatografija isključenja veličine koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
Donja infografika daje više informacija o razlici između ionske izmjene i kromatografije za isključivanje veličine.
Sažetak – Ionska izmjena u odnosu na kromatografiju za isključivanje veličine
Kromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih smjesa. Ključna razlika između ionske izmjene i kromatografije isključenja veličine je u tome što se kromatografija ionske izmjene koristi za analizu ionskih tvari prema naboju, dok se kromatografija isključenja veličine koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
