Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustoće je u tome što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u smjesi na temelju veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustoće odvaja čestice u smjesi na temelju gustoće čestica.
Centrifugiranje je metoda odvajanja različitih komponenti u mješavini analita. Ova metoda uključuje rotaciju uzorka oko fiksne osi, što uzrokuje stvaranje centrifugalne sile. Centrifugalna sila uzrokuje kretanje čestica u uzorku kroz tekući medij. Ovaj proces uzrokuje taloženje čestica ili stanica različitih veličina i gustoća različitim brzinama.
Što je diferencijalna centrifugacija?
Diferencijalno centrifugiranje je analitička tehnika u kojoj možemo odvojiti čestice u smjesi ovisno o veličini čestice. To je najjednostavniji oblik centrifugiranja, a naziva se i diferencijalno peletiranje. Ova metoda je važna za odvajanje komponenti u ćeliji. Čestice različitih veličina podvrgavaju se sedimentaciji različitim brzinama nakon centrifugiranja. Drugim riječima, velike čestice talože se brže od manjih čestica. Štoviše, brzina sedimentacije može se povećati povećanjem centrifugalne sile.
Kada se razmatra njegova primjena, diferencijalno centrifugiranje je korisno u prikupljanju stanica ili proizvodnji sirovih substaničnih frakcija iz homogenata tkiva.npr. homogenat jetre sadrži jezgre, mitohondrije, lizosome i membranske vezikule. Ako ovaj homogenat centrifugiramo na maloj brzini i kratko vrijeme, možemo dobiti velike jezgre kao talog. Ako koristimo veliku centrifugalnu silu, tada možemo dobiti mitohondrije u peletu. Međutim, biološki uzorci uvijek su skloni kontaminaciji.
Što je centrifugiranje s gradijentom gustoće?
Centrifugiranje s gradijentom gustoće je analitička tehnika u kojoj možemo odvojiti čestice u mješavini analita na temelju gustoće čestica. U ovoj metodi, tvari se koncentriraju u otopini cezijevih soli ili u saharozi. Metoda uključuje frakcioniranje čestica na temelju gustoće uzgona. Gradijent gustoće u ovoj metodi je medij cezijeve soli ili saharoze. Postoje dvije vrste centrifugiranja s gradijentom gustoće: centrifugiranje po brzini i izopikničko centrifugiranje.
Zonalno centrifugiranje brzine uključuje medij za odvajanje koji ima slojevitu strukturu s uskom zonom na vrhu gradijenta gustoće. U ovom procesu, čestice se kreću različitim brzinama pod djelovanjem centrifugalne sile, ovisno o gustoći čestica. Obično sve čestice proizvode kuglice jer je gustoća čestica veća od gradijenta gustoće.
Izopikničko centrifugiranje druga je vrsta metode centrifugiranja s gradijentom gustoće. Počinje s homogenom otopinom. Pod djelovanjem centrifugalne sile, čestice u smjesi analita se kreću sve dok gustoća čestica ne postane slična gradijentu gustoće. Stoga ovu tehniku možemo nazvati i ravnotežnim centrifugiranjem.
Koja je razlika između diferencijalnog i gradijentnog centrifugiranja?
Diferencijalno centrifugiranje i centrifugiranje s gradijentom gustoće dvije su vrste procesa centrifugiranja uključenih u odvajanje komponenata u mješavini analita. Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustoće je u tome što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u smjesi na temelju veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustoće odvaja čestice u smjesi na temelju gustoće čestica.
U nastavku infografika prikazuje više razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustoće.
Sažetak – Centrifugiranje diferencijalno u odnosu na gradijent gustoće
Diferencijalno centrifugiranje i centrifugiranje s gradijentom gustoće dvije su vrste procesa centrifugiranja uključenih u odvajanje komponenata u mješavini analita. Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustoće je u tome što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u smjesi na temelju veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustoće odvaja čestice u smjesi na temelju gustoće čestica.
