Ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije je u tome što je elektroporacija tehnika koja koristi električni puls visokog napona za isporuku DNK u stanice domaćina, dok je mikroinjekcija tehnika koja koristi staklenu iglu s finim vrhom ili mikropipetu za isporuku DNK u stanice domaćina.
Transformacija je proces kojim se strana DNK prenosi u stanice domaćina. Transformacijom se može promijeniti genetski sastav organizma. Postoje različite kemijske, biološke i fizičke metode transformacije. Neke su izravne, a neke neizravne metode. Elektroporacija i mikroinjekcija su dvije fizičke metode koje su metode izravne transformacije. Elektroporacija koristi električno polje za induciranje mikroskopskih pora u membranama bioloških stanica kako bi se DNK ugradila u stanice domaćina. Mikroinjekcija, s druge strane, izravno isporučuje DNK pomoću mikropipete ili staklene igle s finim vrhom.
Što je elektroporacija?
Elektroporacija je tehnika transformacije koja isporučuje DNK u biljne stanice i protoplaste. Ova tehnika koristi električni impuls visokog napona. Biljni materijali se inkubiraju u puferskoj otopini koja sadrži DNK. Zatim se otopina podvrgne visokonaponskom električnom pulsu. U membranama biljnih stanica stvaraju se pore izazvane visokim naponom, a kroz te pore DNK migrira unutar stanica i integrira se s biljnom genomskom DNK. Učinkovitost ove metode ovisi o biljnom materijalu i uvjetima tretiranja.
Slika 01: Elektroporacija
Kada se transformacija provodi elektroporacijom, samo 40 do 50 % stanica prima DNK. Štoviše, samo 50 % transformiranih stanica može preživjeti ovom metodom. Međutim, ova je metoda jednostavna za izvođenje i ne mijenja biološku strukturu ili funkciju stanica. Štoviše, može se koristiti za širok raspon ćelija.
Što je mikroinjekcija?
Mikroinjekcija je tehnika transformacije koja je posebno korisna pri uvođenju DNK u velike stanice. Ova metoda koristi staklenu iglu s finim vrhom ili mikropipetu za isporuku DNK u biljne protoplaste ili životinjske stanice (oocite, jaja i embrije). Zapravo, ova metoda je prikladnija za stvaranje transgenih životinja kao što su miševi. U ovoj se metodi DNA ugrađuje izravno u jezgru ili citoplazmu.
Slično elektroporaciji, mikroinjekcija je tehnika izravne transformacije. Mikroinjektiranje se izvodi pod posebnim mikroskopom. Kompjuterizirana kontrola držanja pipete, igle, postolja mikroskopa i video tehnologije povećali su učinkovitost ove tehnike. Prilikom ubrizgavanja DNK, boja se može koristiti za jednostavnu identifikaciju transformiranih stanica. Stoga, nema potrebe za korištenjem posebne metode za identifikaciju transformiranih stanica. Ono što je najvažnije, postupak mikroinjektiranja ne zahtijeva markerski gen.
Slika 02: Mikroinjekcija
Štoviše, ova je metoda vrlo učinkovita i ponovljiva. Međutim, ova metoda je skupa, dugotrajna i zahtijeva kvalificirano osoblje. Također, samo mali broj stanica može se tretirati ovom metodom.
Koje su sličnosti između elektroporacije i mikroinjekcije?
- I elektroporacija i mikroinjekcija dvije su vrste tehnika transformacije.
- Ove metode isporučuju DNK u biljne stanice i protoplaste.
- To su izravne metode.
- Štoviše, to su fizičke ili mehaničke metode.
- Obje metode su korisne pri proizvodnji transgenih biljaka i životinja.
Koja je razlika između elektroporacije i mikroinjekcije?
Tehnika elektroporacije koristi električno polje za uvođenje DNK dok je tehnika mikroinjektiranja mikropipeta ili staklena igla s finim vrhom za uvođenje DNK. Dakle, ovo je ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije. Štoviše, elektroporacija se uglavnom koristi za biljne stanice i protoplaste, dok se mikroinjekcija uglavnom koristi za životinjske stanice. Osim toga, elektroporacija ne oduzima toliko vremena kao mikroinjekcija.
Infografika u nastavku sažima razlike između elektroporacije i mikroinjekcije u obliku tablice.
Sažetak – elektroporacija nasuprot mikroinjektiranju
Elektroporacija i mikroinjekcija dvije su fizičke metode prijenosa gena. Elektroporacija koristi visokonaponsko električno polje dok mikroinjekcija koristi staklenu iglu ili mikropipetu. Dakle, ovo je ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije. Međutim, obje metode izravno uvode egzogenu DNK u stanice domaćina.
