Ključna razlika između RIA i ELISA je u tome što je radioimunotest (RIA) tehnika imunotestiranja koja koristi radioizotope za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo, dok je enzimski imunotest (ELISA) tehnika imunotestiranja koja koristi enzime za otkrivanje antigena -kompleksi antitijela.
Detekcija specifičnih proteina kao što su antigeni iznimno je važna u dijagnozi bolesti. Stoga su RIA i ELISA dvije tehnike imunološkog ispitivanja koje se koriste u laboratorijima za brzo otkrivanje specifičnih proteina, posebno antigena. Općenito, specifično protutijelo veže se na ciljani antigen i tvori vidljivi kompleks poznat kao precipitin. Ovi kompleksi antitijela i antigena mogu se identificirati različitim tehnikama. Tehnika detekcije kompleksa antigen-antitijelo pomoću radioizotopa poznata je kao RIA, a tehnika detekcije kompleksa antigen-antitijelo pomoću enzima poznata je kao ELISA.
Što je RIA?
Radioimunotest (RIA) je tehnika imunološkog testa koja otkriva komplekse antigena i antitijela pomoću radioizotopa. Rosalyn Sussman Yalow razvila je ovu tehniku 1960. godine uz pomoć Solomona Bersona. Za ovo izvanredno otkriće Rosalyn Sussman Yalow je 1977. godine osvojila Nobelovu nagradu za medicinu. Obično se u radioimunoanalizi poznata količina antigena prvo učini radioaktivnom. Ova tehnika često koristi gama-radioaktivne izotope joda, nazvane 125-I, za označavanje antigeni. Ti se radioizotopi normalno vežu za aminokiselinu tirozin antigena. Zatim se radioaktivno obilježeni antigen pomiješa s antitijelom. Kao rezultat, radioaktivno obilježeni antigen i antitijelo specifično se vežu jedno za drugo.
Kasnije se dodaje uzorak seruma koji sadrži nepoznatu količinu istog antigena. To uzrokuje da se neobilježeni antigen iz seruma natječe s radioaktivno obilježenim antigenom za mjesta vezanja antitijela. Kako se koncentracija neobilježenog antigena povećava, sve više se veže za antitijelo, istiskujući radioaktivno obilježenu varijantu. Stoga smanjuje omjer radioaktivno obilježenog antigena vezanog na antitijela prema slobodnom radioaktivno obilježenom antigenu. Na kraju postupka odvajaju se vezani antigeni. U konačnici, radioaktivnost slobodnih antigena u preostalom supernatantu mjeri se pomoću gama brojača.
Što je ELISA?
ELISA je tehnika imunotestiranja koja otkriva komplekse antigena i antitijela pomoću enzima. To je biokemijski analitički test koji su prvi opisali Engvall i Perlmann 1971. U većini jednostavnih oblika ELISA tehnika, antigeni uzorka pacijenta pričvršćeni su na čvrstu površinu. Zatim se odgovarajuće protutijelo nanosi na površinu kako bi se moglo vezati za antigen.
Slika 01: ELISA
Ovo određeno antitijelo povezano je s enzimom. Kasnije se sva nevezana antitijela uklanjaju pranjem deterdžentom. U završnom koraku ove tehnike dodaje se supstrat enzima. Ako postoji pravilno vezanje antigena i antitijela, naknadna reakcija proizvodi signal boje koji se može detektirati, najčešće promjenu boje.
Koje su sličnosti između RIA i ELISA?
- RIA i ELISA su tehnike imunotestiranja.
- Obje tehnike posjeduju stvaranje kompleksa antigena i antitijela.
- Ove se tehnike mogu koristiti za otkrivanje nepoznatih proteina u uzorcima.
- Oboje se koriste u dijagnostici bolesti u laboratorijima.
- Obje su vrlo specifične i osjetljive tehnike.
Koja je razlika između RIA i ELISA?
RIA je tehnika imunoanalize za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo pomoću radioizotopa. ELISA je tehnika imunološkog testa za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo pomoću enzima. Dakle, ovo je ključna razlika između RIA i ELISA. Štoviše, u tehnici RIA, antigen je obilježen, ali u ELISA, antitijelo je obilježeno. Nadalje, u tehnici RIA, molekule za označavanje su radioizotopi, dok su u ELISA-i molekule za označavanje enzimi. Dakle, ovo je još jedna razlika između RIA i ELISA.
Infografika u nastavku prikazuje više razlika između RIA i ELISA testa u tabličnom obliku.
Sažetak – RIA vs ELISA
Imunotestovi imaju vrlo važnu ulogu u različitim bioanalitičkim postavkama, kao što su klinička dijagnostika, biofarmaceutska analiza, praćenje okoliša, biološka sigurnost i testiranje hrane. Od 1960-ih razvijen je širok raspon imunotestova. I RIA i ELISA su tehnike imunotestiranja. RIA je tehnika imunotestiranja za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo pomoću radioizotopa. ELISA je tehnika imunološkog testa za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo pomoću enzima. Dakle, ovo je sažetak razlika između RIA i ELISA.
