Ključna razlika između radioimunoeseja i imunoradiometrijskog testa je u tome što se u radioimunotestovima uzorak ili spoj koji se mjeri kombinira s radioaktivnim antigenom prije kombinacije, dok se u imunoradiometrijskom testu uzorak ili spoj odmah kombinira s radioaktivno obilježenim antitijela.
Imunotest je biokemijski test koji otkriva prisutnost ili koncentraciju makromolekula u otopini pomoću antitijela ili antigena. Za mjerenje antigena u uzorku koriste se fluorescentna i radioaktivna protutijela. U početku su se antitijela koristila u tehnikama precipitacije kao što su imunoprecipitacija, imunodifuzija i imunološka elektroforeza za analizu proteina u serumu. Trenutačno se za mjerenje lijekova, tumorskih markera i hormona koriste vrlo osjetljive tehnike kao što su radioimunotestovi i imunoradiometrijski testovi.
Što je radioimunotest?
Radioimunotest (RIA) je imunotest koji koristi radioaktivne elemente postupnim stvaranjem kompleksa antigen-antitijelo. RIA obično koristi radioaktivna protutijela za otkrivanje količine antigena u uzorku. RIA je vrlo specifičan i vrlo osjetljiv in vitro test. Načelo koje stoji iza RIA-e je obvezujuća konkurencija. Ovdje se radioaktivni antigen natječe protiv neradioaktivnog antigena za stalnu količinu antitijela ili veznih mjesta za receptore. RIA zahtijeva posebne dozvole i mjere opreza budući da se koriste radioaktivne tvari i ostaje među najjeftinijim tehnikama.
Slika 01: Imunotest
Tijekom RIA-e, poznata količina antigena često postaje radioaktivna označavanjem gama-radioaktivnim izotopima joda vezanog za tirozin. Tada se taj antigen kombinira s poznatom količinom antitijela. Ovdje se i antigen i antitijelo specifično vežu jedno za drugo. Zatim se dodaje uzorak krvnog seruma kako bi se započela kompetitivna reakcija između obilježenih antigena i neobilježenih antigena u serumu sa specifičnim antitijelima. U ovoj reakciji antitijela oslobađaju određenu količinu obilježenog antigena. Ova je količina proporcionalna omjeru obilježenog i neobilježenog antigena. Konačno, generira se krivulja vezanja kako bi se dobila količina antigena u krvnom serumu pacijenta.
Što je imunoradiometrijski test?
Imunoradiometrijski test (IRMA) je imunotest koji koristi radioaktivno obilježena antitijela. U IRMA-i, antitijela su obilježena pomoću radioizotopa. Ta se protutijela vežu za antigene prisutne u specifičnom uzorku. U pozitivnom uzorku, antitijela koja su radioaktivno obilježena vežu se na slobodne epitope antigena. Ovo stvara kompleks antigen-antitijelo.
Tijekom druge reakcije, označena antitijela koja nisu vezana uklanjaju se pomoću antigena u čvrstoj fazi. Preostali broj radioaktivnih protutijela u otopini izravna je funkcija koncentracije antigena. IRMA je poznata kao analiza viška reagensa gdje se kao reagens koristi višak količine radioaktivno obilježenih antitijela. Ovdje se dopušta reakcija prekomjerne koncentracije obilježenog antitijela ili antigena. Kao posljednji korak, antigen vezana i slobodna antitijela se odvajaju, a antigen vezana frakcija podvrgava se radioaktivnim testovima. Ovdje je aktivnost frakcije izravno proporcionalna koncentraciji antigena.
Koje su sličnosti između radioimunotestova i imunoradiometrijskih testova?
- I radioimunotest i imunoradiometrijski test su imunotestovi koji koriste radioaktivne elemente u postupnom stvaranju kompleksa antigen-antitijelo.
- Tvore kompleks antigen-antitijelo.
Koja je razlika između radioimunog i imunoradiometrijskog testa?
Radioimunotest je imunološki test koji određuje razine antitijela pomoću antigena obilježenog radioizotopom, dok je imunoradiometrijski test test viška reagensa koji koristi višak koncentracije radioaktivno obilježenog antitijela. Dakle, ovo je ključna razlika između radioimunotesta i imunoradiometrijskog testa. IRMA može pružiti veću osjetljivost od RIA. U RIA, antigeni su obilježeni gama-radioaktivnim izotopima joda, dok su u IRMA protutijela obilježena pomoću izotopa joda. Dakle, ovo je također razlika između radioimunotesta i imunoradiometrijskog testa. Budući da je IRMA tehnika viška reagensa, analiza se provodi u kraćem vremenu nego RIA.
Sljedeća tablica sažima razlike između radioimunotestova i imunoradiometrijskih testova.
Sažetak – Radioimunotest naspram imunoradiometrijskog testa
Radioimunotest je imunotest koji koristi radioaktivne elemente u postupnom stvaranju za određivanje razine antitijela. RIA obično koristi radioaktivna protutijela. Radioaktivni antigen natječe se s neradioaktivnim antigenom za stalnu količinu antitijela ili veznih mjesta za receptore. Imunoradiometrijski test je imunotest koji se provodi za određivanje razine antigena u uzorku pomoću radioaktivno obilježenih antitijela. Ta se protutijela vežu za antigene prisutne u specifičnom uzorku. Na kraju svakog testa formira se kompleks antigen-antitijelo. Kako bi se dobili rezultati testova, crta se krivulja vezanja. U radioimunoanalizi, količina obilježenog antigena proporcionalna je omjeru obilježenog prema neobilježenom antigenu, ali u imunoradiometrijskom ispitivanju, aktivnost frakcije vezane na antigen izravno je proporcionalna koncentraciji antigena. Ovo je sažetak razlika između radioimunotesta i imunoradiometrijskog testa.
