Ključna razlika između pBR322 i pUC19 je u tome što je pBR322 plazmidni vektor koji ima 4361 par baza, dok je pUC19 plazmidni vektor koji ima 2686 parova baza.
Vektor za kloniranje mali je komadić DNK koji se može stabilno održavati u organizmu. To je također mali komadić DNK u koji se može umetnuti strani fragment DNK u svrhu kloniranja. Vektor sadrži važne značajke koje omogućuju prikladno umetanje fragmenta strane DNA u vektore, kao što su restrikcijska mjesta, marker koji se može odabrati, reporterski gen i element ekspresije. Kloniranje je prvo izvedeno pomoću E.coli. Vektori za kloniranje E. coli uključuju plazmide, bakteriofage, kozmide i bakterijske umjetne kromosome (BAC). Najčešće korišteni vektori su genetski modificirani plazmidi. pBR322 i pUC19 dvije su vrste plazmidnih vektora.
Što je pBR322?
pBR322 je plazmidni vektor. To je jedan od prvih široko korištenih vektora za kloniranje E. coli. Ovaj je vektor prvi put stvoren 1977. u laboratoriju Herberta Boyera na Kalifornijskom sveučilištu u San Franciscu. To je kružna dvolančana DNK koja ima 4361 par baza.
Slika 01: pBR322
Ovaj plazmidni vektor ima posebne značajke. Obično ima dva gena za otpornost na antibiotike: gen bla koji kodira protein otpornosti na ampicilin (AmpR) i gen tetA koji kodira otpornost na tetraciklin (TetR) bjelančevine. Štoviše, sadrži ishodište replikacije pMB1. Ovaj plazmidni vektor također ima rop gen koji kodira restriktor broja kopija plazmida. Nadalje, ovaj vektor ima jedinstvena restrikcijska mjesta za više od 40 restrikcijskih enzima. Jedanaest od tih četrdeset restrikcijskih mjesta nalazi se unutar TetR gena. Postoje dva restrikcijska mjesta za restrikcijske enzime HindIII i ClaI unutar promotora TetR gena. Nadalje, postoji šest vrlo važnih restrikcijskih mjesta unutar gena AmpR. pBR322 je vektor za kloniranje s malim brojem kopija. Otprilike osigurava 20 kopija plazmida po bakterijskoj stanici. Molekularna težina vektora je 2,83×106 d altona.
Što je pUC19?
pUC19 je plazmidni vektor dužine 2686 parova baza. To je jedan od niza plazmidnih vektora koje su stvorili Joachim Messing i suradnici. Rani rad na ovoj seriji plazmida proveden je na Kalifornijskom sveučilištu. To je kružna dvolančana DNK.
Slika 02: pUC19
Ovaj plazmidni vektor također sadrži važne značajke. Ima N terminalni fragment gena za β glaktozidazu (lacz). Također ima višestruko područje kloniranja (MCS). Ova regija je podijeljena na kodone 6 i 7 gena lacz. MCS regija osigurava mnoga restrikcijska mjesta restrikcijskih endonukleaza. Uz gen za β glaktozidazu, pUC19 također kodira za gen otpornosti na ampicilin (AmpR). Štoviše, ishodište replikacije izvedeno je iz plazmida pMB1. Iako je pUC19 male veličine, ima visok broj kopija (500-700 kopija po bakterijskoj stanici). Molekularna težina ovog plazmidnog vektora je 1,75×106 d altona.
Koje su sličnosti između pBR322 i pUC19?
- pBR322 i pUC19 dvije su vrste plazmidnih vektora.
- Oni su popularni vektori za kloniranje coli.
- Oba plazmidna vektora imaju isti ishodišni oblik replikacije plazmida pMB1.
- Ovi vektori imaju više restrikcijskih mjesta.
- Oba plazmidna vektora imaju gen otpornosti na ampicilin kao biljeg koji se može odabrati.
Koja je razlika između pBR322 i pUC19?
pBR322 je plazmidni vektor koji ima 4361 par baza u duljinu, dok je pUC19 plazmidni vektor koji ima 2686 parova baza u duljinu. Dakle, ovo je ključna razlika između pBR322 i pUC19. Nadalje, pBR322 je plazmidni vektor s malim brojem kopija, dok je pUC19 plazmidni vektor s visokim brojem kopija.
Infografija u nastavku predstavlja razlike između pBR322 i pUC19 u obliku tablice za usporedbu.
Sažetak – pBR322 vs pUC19
Najčešće korišteni vektori za kloniranje E.coli su genetski modificirani plazmidi.pBR322 i pUC19 su dvije vrste plazmidnih vektora. pBR322 je plazmidni vektor koji ima 4361 par baza u duljinu, dok je pUC19 plazmidni vektor koji ima 2686 parova baza u duljinu. Dakle, ovo je ključna razlika između pBR322 i pUC19.
