Ključna razlika između izolacije DNA i RNA je u tome što je izolacija DNA postupak u kojem se vrsta nukleinske kiseline koja se naziva DNA ekstrahira iz biološke stanice, dok je izolacija RNA postupak u kojem se vrsta nukleinske kiseline koja se naziva RNA izdvaja ekstrahiran iz biološke stanice.
Izolacija nukleinske kiseline početna je točka u velikom nizu daljnjih primjena. Visoka kvaliteta nukleinskih kiselina u početnim uzorcima ključni je čimbenik za uspjeh kasnijih daljnjih primjena. Izolacija nukleinske kiseline može se definirati kao niz koraka za dobivanje nukleinske kiseline u uzorku čistoće koji se može koristiti za različite daljnje korake primjene. Svrha ekstrakcije nukleinske kiseline je dezintegracija stanične membrane i postizanje maksimalne eliminacije lipida i proteina kako bi se dobile čiste nukleinske kiseline kao što su DNA ili RNA.
Što je izolacija DNK?
Izolacija DNK je rutinski postupak u kojem se vrsta nukleinske kiseline koja se zove DNK ekstrahira iz biološke stanice. Izolacija DNK izvodi se izdvajanjem DNK iz krvi, uzoraka zamrznutog tkiva i parafinskih blokova tkiva. Tri su glavna koraka u izolaciji DNK, uključujući lizu stanice, ekstrakciju DNK i taloženje. Kod stanične lize, stanice u uzorku se često odvajaju jedna od druge fizičkim sredstvima kao što je mljevenje ili vrtloženje i stavljaju u otopinu koja sadrži sol. Obično pozitivno nabijeni ioni natrija u soli pomažu u zaštiti negativno nabijenih fosfatnih skupina koje se protežu duž okosnice DNK. Kasnije se dodaje deterdžent za razgradnju lipida u staničnoj membrani i jezgri, koji oslobađaju DNK kada se te membrane poremete.
Slika 01: Izolacija DNK
Ekstrakcija DNK izvodi se kako bi se dobio čisti uzorak DNK. Često se dodaje enzim proteaza za razgradnju proteina povezanih s DNA i drugih staničnih proteina. Štoviše, dio staničnih ostataka može se ukloniti filtriranjem uzorka. Konačno, DNK se taloži pomoću alkohola. Nadalje, ako ima puno DNK, može se primijetiti škrti bijeli talog na kraju postupka.
Što je izolacija RNK?
Izolacija RNK je postupak u kojem se vrsta nukleinske kiseline koja se naziva RNK ekstrahira iz biološke stanice. Ovaj postupak često je kompliciran prisutnošću enzima ribonukleaze u stanicama i tkivima koji razgrađuju RNA. U molekularnoj biologiji koristi se nekoliko metoda za izolaciju RNA iz uzoraka, kao što je ekstrakcija gvanidinij-tiocijanat-fenol-kloroform.
Slika 02: Izolacija RNK
Izolacija RNA obično se sastoji od nekoliko koraka, uključujući staničnu lizu i homogenizaciju, gašenje biokemijskih procesa, particiju nukleinske kiseline, pronalaženje RNA, sirovo pročišćavanje i procjenu kvalitete RNA. Metoda lize i elucije temeljena na filtarskom papiru ima visoku propusnu moć ekstrakcije RNK. Nadalje, ekstrakcija RNA u tekućem dušiku pomoću tarionika i tučka također je vrlo korisna metoda jer sprječava aktivnost ribonukleaze.
Koje su sličnosti između izolacije DNK i RNK?
- Izolacija DNA i RNA dvije su vrste postupaka izolacije nukleinske kiseline.
- Oba postupka imaju slične osnovne korake, kao što su liza stanica, ekstrakcija i pročišćavanje.
- Ovi postupci izoliraju važne tipove nukleinskih kiselina koje imaju niz nizvodnih primjena.
- Oni se izvode u laboratorijskim postavama.
- Mogu se izvesti pomoću proizvedenih kompleta.
Koja je razlika između izolacije DNK i RNK?
Kod izolacije DNK, vrsta nukleinske kiseline koja se naziva DNK ekstrahira se iz biološke stanice, dok se kod izolacije RNK, vrsta nukleinske kiseline koja se naziva RNK ekstrahira iz biološke stanice. Dakle, ovo je ključna razlika između izolacije DNA i RNA. Nadalje, izolacija DNA obično se provodi na oko pH 7 do 8, dok se izolacija RNA obično provodi na oko pH 4,5.
Infografija u nastavku predstavlja razlike između izolacije DNA i RNA u tabličnom obliku za usporedbu.
Sažetak – izolacija DNA vs RNA
Izolacija DNA i RNA dvije su vrste postupaka izolacije nukleinske kiseline. Izolacija DNA je postupak tijekom kojeg se iz biološke stanice izdvaja DNA. Izolacija RNA je postupak tijekom kojeg se RNA ekstrahira iz biološke stanice. Dakle, ovo je ključna razlika između izolacije DNA i RNA.
