Ključna razlika između ukupnog broja stanica i broja živih stanica je u tome što ukupni broj stanica procjenjuje sve stanice uključujući žive i mrtve mikrobne stanice u uzorku, dok broj živih stanica procjenjuje samo žive mikrobne stanice u uzorku.
Brojanje broja organizama unutar populacije smatra se nužnim za većinu eksperimentalnog rada. Stoga nastojimo izravnim i neizravnim metodama analizirati broj mikroba u uzorku. Izravna mjerenja uključuju metode koje izravno broje broj stanica. Neizravna mjerenja uključuju mjerenje nekih parametara koji se mogu povezati s brojem stanica kao što su gustoća stanica, suha težina itd. Neke metode kvantificiraju samo žive mikrobne stanice u uzorku. Broj živih stanica jedna je od takvih metoda. Izravno mikroskopsko brojanje kvantificira sve stanice u poznatom volumenu medija/uzorka pomoću mikroskopa. Stoga broji i žive i mrtve stanice. To je vrsta ukupnog broja ćelija.
Što je ukupni broj ćelija?
Ukupni broj stanica je metoda koja uključuje brojanje svih stanica u poznatom volumenu medija/uzorka pomoću mikroskopa i komore za brojanje (hemocitometar). Za razliku od brojanja živih stanica, broje se i žive i mrtve stanice. Stoga je ovo ukupan broj osim ako se tijekom promatranja ne nanese boja za vitalnost. Kod mikroskopa se stanice promatraju izravno pod mikroskopom i broje. Koristi suspenziju stanica koja se sastoji od mikrobnih stanica. Radi lakšeg brojanja i točnih mjerenja, može se napraviti razrjeđivanje uzorka. U vrlo visokim/niskim koncentracijama stanica, dobivanje ukupnog broja stanica pomoću mikroskopa je težak zadatak.
Slika 01: Komora za brojanje – hemocitometar
Komore za brojanje su jednostavne, jeftine i brze za uzimanje ukupnog broja stanica. Što je najvažnije, komore za brojanje korisne su za brojanje i eukariota i prokariota. Brojimo stanice u odabranim kvadratima poznatog volumena kako bismo kvantificirali ukupni broj stanica.
Što je broj živih stanica?
Brojanje živih stanica je metoda brojanja živih mikrobnih stanica u uzorku. Broji samo žive stanice u uzorku. Brojanje živih ploča, membranska filtracija i najvjerojatniji broj nekoliko su tehnika brojanja živih stanica. Ovi pristupi temelje se na rastu. Metoda brojanja održivih ploča moćna je metoda koja se koristi u mnogim mikrobiološkim područjima, uključujući mikrobiologiju hrane i mliječnih proizvoda, medicinsku mikrobiologiju, mikrobiologiju okoliša, mikrobnu genetiku, razvoj medija za rast i biotehnologiju.
Najčešći način brojanja živih bakterija je korištenje uzorka koji može formirati kolonije na agar mediju. Postoje dva glavna načina izvođenja brojanja ploča: tehnika raširene ploče i tehnika izlijevanja ploče. Poznati volumen uzorka može se rasporediti po površini agar ploče ili umiješati u agar. Ploča se zatim inkubira, a nastale kolonije se broje. Broj kolonija povezan je s brojem mikroorganizama unutar izvornog uzorka. Broj održivih mjeri samo one stanice koje su žive i rastu.
Slika 02: Broj održivih ploča
Najvjerojatniji broj (MPN) alternativa je metodama brojanja ploča za procjenu gustoće populacije živih stanica. Broji organizme koji rastu u tekućoj kulturi i stoga je pretežno bakteriološka tehnika. Osobito je koristan za niske koncentracije organizama, npr. mlijeko, pitka voda.
Tehnika membranske filtracije prikladnija je kada su mikrobi vrlo razrijeđeni kao u gradskom vodovodu. To se radi jednostavnim propuštanjem poznatog volumena tekućine kroz filter i inkubiranjem na hranjivoj podlozi. Broje se kolonije koje se razviju na filteru i izračunava se broj bakterija po mililitru uzorka.
Koje su sličnosti između ukupnog broja stanica i broja živih stanica?
- Ukupni broj stanica i broj živih stanica dvije su vrste mikrobnih tehnika koje kvantificiraju stanice.
- One su tehnike prebrojavanja koje se često koriste u mikrobiološkim laboratorijima.
Koja je razlika između ukupnog broja stanica i broja živih stanica?
Ukupni broj stanica nabraja sve žive i mrtve mikrobne stanice u uzorku. Nasuprot tome, broj živih stanica nabraja samo žive stanice u uzorku. Dakle, ovo je ključna razlika između ukupnog broja stanica i broja živih stanica. Ukupni broj stanica ne ovisi o rastu kolonija na agar pločama, dok je broj živih stanica tehnika koja se temelji na rastu i ovisi o rastu mikrobnih kolonija na agar pločama.
Sljedeća info-grafika sažima razliku između ukupnog broja stanica i broja živih stanica.
Sažetak – Ukupan broj stanica u odnosu na broj živih stanica
Ukupni broj stanica nabraja žive i mrtve mikrobne stanice, dok broj živih stanica nabraja samo žive stanice. Dakle, ovo je ključna razlika između ukupnog broja stanica i broja živih stanica. Također, broj živih stanica je tehnika koja se temelji na rastu, za razliku od ukupnog broja stanica. Štoviše, zahtijeva inkubaciju ploča do dobivanja vidljivih kolonija. Broj živih ploča, MPN i membranska filtracija nekoliko su tehnika brojanja živih stanica, dok su izravna mikroskopija i upotreba hemocitometra dvije tehnike ukupnog broja stanica.
