Ključna razlika – transformanti protiv rekombinanta
Rekombinacija i transformacija dva su ključna koraka u genetičkom inženjeringu, gdje se karakteristike organizma namjerno modificiraju manipuliranjem njegovim genetskim materijalom. Rekombinacija je proces u kojem se strana DNA ugrađuje u vektorski genom i nastaje rekombinantna molekula DNA. Transformacija je sljedeći korak u kojem se rekombinantna molekula unosi u organizam domaćina. Stanica domaćin ili organizam olakšavaju ekspresiju rekombinantne molekule. Ključna razlika između transformanata i rekombinanata je u tome što su transformanti stanice ili organizmi koji uzimaju rekombinantnu molekulu unutra i olakšavaju ekspresiju, dok su rekombinanti vektori koji omogućuju umetanje strane DNK u svoj genom i transport u transformante domaćina za ekspresiju.
Što su transformanti?
Transformanti su stanice ili organizmi u kojima je rekombinantna DNK preuzeta za ekspresiju. Bakterije se obično koriste kao organizmi domaćini u genetičkom inženjeringu budući da ih je lako uzgajati, razmnožavati i rukovati u laboratorijskim uvjetima, a proces transformacije lak je u usporedbi s drugim organizmima. Najpopularnija bakterija domaćin koja se koristi u genetičkom inženjeringu je bakterija E coli.
Tijekom procesa transformacije, stanice domaćina su inducirane da preuzmu rekombinante. Međutim, neke stanice domaćina ne preuzimaju rekombinantne molekule. Oni su poznati kao netransformanti, a stanice koje sadrže rekombinantne DNA molekule u sebi poznate su kao transformanti. Odabir transformanata od netransformanata se vrši korištenjem selektabilnih markera u molekularnoj biologiji. Odabirljivi markeri umetnuti su u vektorski genom zajedno s DNA umetkom. Često korišteni selektivni markeri su geni otporni na antibiotike. Marker geni olakšavaju diferencijaciju transformanata i nastavljaju proces. Nakon procesa transformacije, bakterija se uzgaja u mediju koji sadrži antibiotik. Samo transformanti mogu rasti na tom mediju budući da sadrže rekombinante unutra.
Nakon što se molekula rekombinantne DNK transformira unutar organizma domaćina, strana DNK se može integrirati u genom stanice domaćina ili ostati neintegrirana u citoplazmi. Međutim, ekspresija i replikacija strane DNK odvija se u organizmu domaćina i proizvodi željeni rezultat procesa.
Što su rekombinanti?
Rekombinant je organizam ili stanica koja posjeduje rekombinirani genom koji sadrži stranu DNA. Rekombinanti su rezultat procesa genetskog inženjeringa. Oni su umjetno konstruirani in vitro umetanjem gena od interesa i modificiranjem genoma. Često bakterijski plazmidi i bakteriofagi djeluju kao rekombinanti u genetičkom inženjeringu. Ima himeru različitih DNK. Molekula rekombinantne DNK prenosi stranu DNK u organizam domaćina i tjera je da ekspresira i tvori željeni proizvod.
Rekombinantne molekule konstruirane su pomoću restrikcijskih endonukleaza i DNA ligaza. Željeni fragment DNA odvaja se od izvornog organizma i umeće u vektor kako bi se napravio rekombinant za transformaciju. Rezanje gena od interesa i otvaranje vektorskog organizma trebalo bi se obaviti korištenjem istog restrikcijskog enzima kako bi se stvorili kompatibilni ljepljivi krajevi koji ih spajaju. Nakon što se strana DNK ugradi u vektorski genom, poznata je kao rekombinantna ili rekombinantna molekula DNK.
Slika 02: Rekombinantna DNK
Koja je razlika između transformanata i rekombinanata?
Transformanti vs rekombinanti |
|
| Transformanti su stanice koje u sebi imaju rekombinantnu DNA molekulu. | Rekombinanti su molekule nosači koje imaju stranu DNA umetnutu u vlastiti genom. |
| Izražavanje strane DNK | |
| One su stanice domaćini koje mogu izraziti rekombinantnu DNK. | Trebali bi se moći samoreplicirati unutar organizma domaćina. |
| Odabir | |
| Stanice koje se mogu lako uzgajati i razmnožavati odabrane su kao stanice domaćini. | Moraju se lako izvlačiti i sadržavati markere koji se mogu odabrati. |
Sažetak – Transformanti vs rekombinanti
Transformanti su stanice ili organizmi s rekombinantnim DNA molekulama unutar njih. Rekombinanti su organizmi ili stanice koje su prošle genetsku rekombinaciju i imaju stranu DNA unutar svojih genoma. Bakterijske stanice često se koriste kao stanice domaćini za transformaciju, a plazmidi i bakteriofagi često se koriste kao vektori u tehnologiji rekombinantne DNA. Ovo je razlika između transformanata i rekombinanata.
